REGD . NO. D. L. -33004/99 रजिस्ट्री सं० डी० एल०-33004/99
भारत का राजपत्र The Gazette of India
असाधारण
EXTRAORDINARY
भाग II-खण्ड 3-उप-सखण्ड (ii ) PART II-Section 3-Sub-section ( ii)
प्राधिकार से प्रकाशित
PUBLISHED BY AUTHORITY
नई दिल्ली, मंगलवार , नवम्बर 3 , 2009 / कार्तिक 12 , 1931
सं. 1798]
NEW DELHI, TUESDAY, NOVEMBER 3 , 2009 /KARTIKA 12, 1931
No.1798]
कृषि मंत्रालय ( कृषि और सहकारिता विभाग )
आदेश
नई दिल्ली, 3 नवम्बर , 2009
का.आ. 2803(अ).-केन्द्रीय सरकार , आवश्यक वस्तु अधिनियम, 1955 ( 1955 का 10 ) की धारा 3 द्वारा प्रदत्त शक्तियों का प्रयोग करते हुए, उर्वरक ( नियंत्रण ) आदेश , 1985 का और संशोधन करने के लिए निम्नलिखित आदेश करती है , अर्थात्:-
1. ( 1 ) इस आदेश का संक्षिप्त नाम उर्वरक ( नियंत्रण ) तीसरा संशोधन आदेश , 2009 है ।
(2) यह राजपत्र में प्रकाशन की तारीख को प्रवृत्त होगा ।
2. उवर्रक (नियंत्रण ) आदेश , 1955 में,-
( 1 ) खण्ड 8 के , उप - खण्ड 3 में चौथे परन्तुक के पश्चात्, निम्नलिखित परन्तुक अन्तःस्थापित किए जाएंगे , अर्थात्
" परन्तु कि जहां कार्बनिक उर्वरक का विनिर्माता कोई राज्य सरकार या नगरपालिका है , वहां उसके लिए प्राधिकार पत्र अभिप्राप्त करना आवश्यक नहीं होगा :
परन्तु कि जहां राज्य सरकार या नगरपालिका से भिन्न वर्मी कम्पोस्ट विनिर्माता की वार्षिक उत्पादन क्षमता 50 मीट्रिक टन से कम है , वहां उसके भी प्राधिकार पत्र अभिप्राप्त करना आवश्यक नहीं होगा । "
( 2) खण्ड 14 में उप - खण्ड ( 3 ) के पश्चात् अंत में निम्नलिखित परन्तुक अन्तःस्थापित किए जाएंगे , अर्थात्
" परन्तु कि जहां कार्बनिक उर्वरक का विनिर्माता कोई राज्य सरकार या नगरपालिका है, वहां उसके लिए प्राधिकार पत्र अभिप्राप्त करना आवश्यक नहीं होगा :
परन्तु यह और कि राज्य सरकार या नगरपालिका से भिन्न वर्मी कम्पोस्ट के विनिर्माता की वार्षिक उत्पादन क्षममा 50 मीट्रिक टन से है तो उसके लिए वर्मी कम्पोस्ट तैयार करने के लिए विनिर्माण प्रमाण प्राधिकार पत्र अभिप्राप्त करना आवश्यक नहीं होगा । "
(1)
3974 GI/2009 2
THE GAZETTE OF INDIA : EXTRAORDINARY
[PART IISEC. 3( ii)]
(3) खण्ड 19 में, निम्नलिखित परन्तुक अन्त में अंतः स्थापित किए जायेगें , अर्थातः-
परन्तु नगरपालिकाओं की दशा में अनुसूची IV में शहरी कम्पोस्ट के विनिर्देश केवल तभी लागू होंगे जब इसका कृषि में उपयोग हेतु पैकेज्ड में व्यापार किया जाता है :
परन्तु यह और कि अनुसूची IV में वर्मी कम्पोस्ट के विनिर्देश केवल ऐसे मामलों में ही लागू होंगे जहां इसका विक्रय कृषि प्रयोजनों के लिए और पैकेज्ड रूप में किया जाता है । "
(4) अनुसूची | के भाग क में " उर्वरकों के " विनिर्देश शीर्षक के अधीन
(क ) " ऋजु पोटाशी उर्वरकों " से संबंधित उप शीर्षक 1 ( ग ) के अधीन क्रम सं. 04 और उससे संबंधित प्रविष्टियों के पश्चातनिम्नलिखित क्रम संख्या और प्रविष्टियां अंतः स्थापित की जाएंगी , अर्थातः-
" 5. सीरे से व्युत्पन्न पोटाश
(i) भार के आधार पर आर्द्रता का अधिकतम प्रतिशत
4.79
1.66 (ii ) भार के आधार पर कुल नाइट्रोजन का न्यूनतम प्रतिशत
(iii) भार के आधार पर न्यूट्रल अमोनियम साइट्रेट घुलनशील फास्फेट
0.39 (पी2 ओ 5 के रूप में) का न्यूनतम प्रतिशत
(iv) भार के आधार पर पानी में घुलनशील पोटाश ( के 2 ओ के रूप में ) न्यूनतम प्रतिशत 14.70 "
(ख) एनपीके मिश्रित उर्वरकों से संबंधित उपशीर्षक 1 (ड. ) में , क्रम सं० 12 और उससे संबंधित प्रविष्टियों के पश्चात निम्नलिखित क्रम सं० और प्रविष्टियां अन्तः स्थापित की जायेगी, अर्थातः-
13 एनपीके ( 12: 11 : 18 एम जी ओ के साथ )
(i) भार के आधार पर आर्द्रता का अधिकतम प्रतिशत
1.5
12.0 (ii) भार के आधार पर कुल नाइट्रोजन का न्यूनतम प्रतिशत
7.0
(iii) भार के आधार पर अमोनिकल नाइट्रोजन का न्यूनतम प्रतिशत
5.0
(iv) भार के आधार पर नाइट्रेट नाइट्रोजन का न्यूनतम प्रतिशत
11.0 (v) भार के आंधार पर न्यूट्रल अमोनियम साइट्रेट घुलनशील फास्फेट (पी 2 ओ 5 के रूप में ) का न्यूनतम प्रतिशत
(vi) भार के आधार पर पानी में घुलनशील फास्फेट ( पी 2 ओ 5 के रूप में ) का न्यूनतम प्रतिशत 7.7
18.0 (vii) भार के आधार पर पानी में घुलनशील पोटाश ( के 2 ओ के रूप में ) का न्यूनतम प्रतिशत
1.20 (viii) भार के आधार पर मैगनीशियम ( एम जी के रूप में ) का न्यूनतम प्रतिशत 3
भारत का राजपत्र असाधारण
[भाग II-खण्ड 3(ii) ]
7.6 (ix) भार के आधार पर सल्फर ( एस के रूप में ) का न्यूनतम प्रतिशत
1.0 (X) भार के आधार पर कुल क्लोराईडस ( सी एल के रूप में) का अधिकतम प्रतिशत
(xi ) कण आकार- सामग्री का 90 % से अन्यून 4 मि.मी. भा.मा. छलनी में से छन जायेगा और 1 मि० मी० की भा० मा० छलनी पर रह जायेगा और 5 % से अनधिक 1 मि.मी. भा० मा० छलनी से नीचे रहेगा ।
(5) अनुसूची III में,
(क) भाग क और उससे संबंधित प्रविष्टियों के स्थान पर निम्नलिखित रखा जाएगा , अर्थातः-
"
भाग- क
जैव उर्वरकों काविनिर्देश
1. राइजोबियम
आधार
(i)
= नम/ शुष्क चूर्ण या दानेदार के रूप में वाहक आधारित * या तरल आधारित
(ii ) व्यवहार्य कोशिका संख्या
= सीएफयू चूर्ण , दानेदार या वाहक सामग्री का न्यूनतम 5X10 8 कोशिका प्रति ग्राम अथवा तरल का 1X10 कोशिका प्रति 7 मि.ली.
5 = 10 तनुकरण पर कोई संदूषण नहीं ।
( iii ) संदूषण स्तर
= 6.5-7.5
(iv) पीएच
(v) वाहक आधारित सामग्री की दशा = सभी सामग्री 0.15-0.212 मिमी. भारतीय मानक छलनी में से में कण आकार निकल जाएगी ।
= 30-40%
(vi) आर्द्रता प्रतिशत भार द्वारा वाहक आधारित की दशा में अधिकतम
(vii ) क्षमता विशेषता
= पैकेट पर सूचीबद्ध सभी प्रजातियों पर प्रभावी नोडुलेशन दिखाना चाहिए ।
* वाहक की किस्म:
वाहक सामग्री जैसे पीट , लिग्नाईट, पीट मृदा , खाद- मिट्टी, काठकोयला अथवा समरूप सामग्री जो जीव के विकास में सहायक हो ।
2. एजोटोबैक्टर
= नम/ शुष्क चूर्ण या दानेदार के रूप में वाहक आधारित * अथवा (i) आधार THE GAZETTE OF INDIA : EXTRAORDINARY
[PART II SBC. 3(ii) ].
तरल आधारित
7
(ii) व्यवहार्य कोशिका संख्या = सीएफयूवाष्ठक सामग्री का न्यूनतम 5X10 कोशिका प्रति ग्राम
8
अथवा तरल का 1X10 कोशिका प्रति मि.ली. 5
(iii) संदूषण स्तर = 10 तनुकरण पर कोई संदूषण नहीं ।
(iv) पीएच 6.5-7.5
(v) वाहक आधारित सामग्री की दशा = सभी सामग्री 0.15-0.212 मिमी. भारतीय मानक छलनी में से
में कण आकार निकल जाएगी ।
= 30-40%
(vi ) आर्द्रता प्रतिशत भार द्वारा वाहक आधारित की दशा में अधिकतम
(vii) क्षमता विशेषता
= किस्म में उपभोग किए गए प्रति ग्राम सूकोज के कम से कम 10 मिग्रा नाइट्रोजन के निर्धारण की क्षमता होनी चाहिए ।
* वाहक की किस्म:
वाहक सामग्री जैसे पीट , लिग्नाईट , पीट मृदा , खाद- मिट्टी , काठकोयला अथवा समरूप सामग्री जो जीव के विकास में सहायक हो ।
3. एजोसपिरिलम
आधार
(i)
= नम/ शुष्क चूर्ण या दानेदार के रूप में वाहक आधारित * अथवा तरल आधारित
(ii) व्यवहार्य कोशिका संख्या
= 7 सीएफयू चूर्ण/ दानेदार अथवा वाहक सामग्री का न्यूनतम 5X10 8 कोशिका प्रति ग्राम अथवा तरल का 1 × 10 कोशिका प्रति मि.ली.
(iii) संदूषण स्तर
105 = 10 तनुकरण पर कोई संदूषण नहीं ।
(iv) पीएच
= 6.5-7.5
(v) वाहक आधारित सामग्री की दशा में कणः आकार
= सभी सामग्री 0.15-0.212 मिमी. भारतीय मानक छलनी में से निकल जाएगी ।
= 30-40%
( i) आर्द्रता प्रतिशत भार द्वारा वाहक आधारित की दशा में अधिकतम
(vii) क्षमता विशेषता
= नाइट्रोजन मुक्त अर्धठोस ब्रोमोथाइमोल नीले माध्यम में सफेद झिल्ली का बनना ।
* वाहक की विश्स्म:
वाहक सामग्री जैसे पीट, लिग्नाईट, पीट मृदा, खाद-मिट्टी, काठकोयला अथवा समरूप सामग्री जो जीव के विकास में 5
भारत का राजपत्र असाधारण
[ भाग II-खण्ड 3 (ii) ]
सहायक हो ।
4. फास्फेट घुलनशील बैक्टीरिया
(i) आधार
* नम/शुष्क चूर्ण या दानेदार के रूप में वाहक आधारित * अथवा तरल आधारित
(ii ) व्यवहार्य कोशिका संख्या
7 8 = सीएफयू वाहक सामग्री का न्यूनतम 5X10 मि.ली. कोशिका प्रति ग्राम अथवा तरल का 1X10 कोशिका प्रति
5 = 10 तनुकरण पर कोई संदूषण नहीं ।
(iii) संदूषण स्तर
(iv) पीएच
= 6.5-7.5 नम / शुष्क चूर्ण दानेदार वाहक आधारित और 5.0- 7.5 तरल आधारित के लिए
= सभी सामग्री 0.15-0.212 मिमी. भारतीय मानक छलनी में से निकल जाएगी ।
(v) वाहक आधारित सामग्री की दशा में कण आकार
= 30-40%
(vi ) आर्द्रता प्रतिशत भार द्वारा वाहक आधारित की दशा में अधिकतम
(vii) क्षमता विशेषता
= स्पैक्ट्रोफोटोमीट्रिक रूप से परीक्षण करने पर किस्म में कम से कम 30% की रेंज में फास्फेट को घोलने की क्षमता होनी चाहिए । जोन बनने के हिसाब से निर्धारित माध्यम में न्यूनतम 5 मि.मी. घुलनशील जोन जिसमें कम से कम 3 मि.मी. मोटाई हो ।
* वाहक की किस्म:
वाहक सामग्री जैसे पीट , लिमाईट, पीट मृदा, खाद- मिट्टी, काठकोयला अथवा समरूप सामग्री जो जीव के विकास में सहायक हो ।
5 (ख) भाग ख में, " जैव उर्वरक की सहन सीमा " शीर्ष के अधीन , " वाहक का 5X10 प्रति सीएफयू/ प्रति ग्राम अथवा तरलतरल सामग्री का प्रति मि० ली० " शब्दों और अंको के स्थान पर " चूर्ण या दानेदार के रूप में वाहक सामग्री का1X10 सीएफयू/ग्राम अथवा तरल सामग्री का 5X10 सीएफयू/ ग्राम शब्द और अंक रखे जाएंगे । 7 7
( ग) भाग ग और उससे संबंधित प्रविष्टियों के स्थान पर शीर्षक के अधीन निम्नलिखित रखा जाएगा , अर्थात् 6
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[ PART II-SEC..3 ( ii) ]
भाग -ग
जैव उर्वरक के नमूने लेने की प्रक्रिया
जैव उर्वरकोंके नमूना तैयार करने की प्रक्रिया :
" 1. नमूना तैयार करने की सामान्य अपेक्षाएं
1.0 नमूनों को लेने , तैयार करने और रखरखाव में निम्नलिखित सावधानियों और निर्देशों का पालन किया जाना चाहिए ।
1.1 क्योंकि यह आवश्यक है कि नमूना जांच किए जाने वाले ढेर का प्रतिनिधि होता है इसलिए नमूना लेने का कार्य प्रशिक्षित और अनुभवी व्यक्ति द्वारा किया जाना चाहिए ।
1.2 नमूनों को उनकी वास्तविक स्थिति में बंद पैकेटों से लिए जाय और उन्हें प्रयोगशाला में भेजा जाय जिससे रखरखाव के दौरान नमूनों के संभावित संदूषण से बचा जा सकेगा और सामग्री की शुद्ध स्थिति को स्पष्ट करने में सहायता मिलेगी ।
1.3 स्वच्छ पैकेटों को संरक्षित स्थान से लिया जाय जो नमी , हवा , प्रकाश धूल अथवा कालिख में खुला न हो । "
2. नमूनों का पैमाना
2.1 ढेर
सभी इकाइयां ( किसी एक प्रकार की सामग्री की एक खेप जो विनिर्माण के एक ही बैच से संबंधित हो के कन्टेनर्स ) एक ढ़ेर से संबंधित होगी । यदि किसी खेप में विनिर्माण के भिन्न - भिन्न बैच हों तो एक बैच वाले कन्टेनरों को अलग किया जाय और उनका अलग ढेर बनाया जाए ।
2.2 बैच
किसी बैच फरमेन्टर या फ्लास्कों ( कन्टेनरों ) के एक समूह से तैयार किया गया कोई संरोपण (इनोकुलेन्ट ) एक बैच गठित करेगा ।
2.3 विनिर्देश की अपेक्षाओं के लिए सामग्री की सुनिश्चितता निर्धारित करने के लिए नमूनों के प्रत्येक ढ़ेर से अलग- अलग रूप से जांच की जाएगी ।
2.4 एक ढेर से चयन किए गए पैकेटों की संख्या ढेर के आकार पर निर्भर करेगी और इन पैकेटों का चयन यादृच्छिक रूप से किया जाएगा और चयन की यादृच्छिकता को सुनिश्चित करने के लिए आई एस 4905 में दी गई प्रक्रिया शब्दोंका अनुसरण किया जाए । "
" 3. नमूनों का लिया जाना:
3.1 निरीक्षक एक ही बैच से तीन पैकेट नमूना के रूप में लेगा । प्रत्येक नमूना एक परीक्षण नमूना होगा ।
3.2 नमूने कपड़े के थैलों में मुहर बंद होने चाहिए और इसके अन्दर फार्म पी रखने के बाद निरीक्षक की मुहर से 7
भारत का राजपत्र असाधारण
[ भाग II-खण्ड 3 (ii) ]
सील किया जाना चाहिए । पहचानगत ब्यौरे जैसे नमूना संख्या , कोड संख्या या कोई अन्य ब्यौरे जो इसकी पहचान में मदद करते हैं, कपड़े के थैले पर अंकित किए जायेंगे ।
3.3 एकत्र किए गए तीन नमूनों में से इस प्रकार सील किया गया एक नमूना खण्ड 29 के अधीन राज्य सरकार द्वारा अधिसूचित प्रयोगशाला के प्रभारी या राष्ट्रीय कार्बनिक खेती केन्द्र या इसके किसी भी क्षेत्रीय केन्द्र को भेजा जायेगा । दूसरा नमूना यथास्थिति विनिर्माता अथवा आयातक अथवा डीलर , को दिया जायेगा । तीसरा नमूना निरीक्षक द्वारा अपने अगले उच्चतर प्राधिकारी के पास सुरक्षित अभिरक्षा रखने के लिए भेजा जायेगा । बाद के दो नमूनों में से किसी को खण्ड 29 ख के उप खण्ड ( 2 ) के अधीन संदर्भी विश्लेषण के लिए भेजा जायेगा ।
ढेर में से लिए जाने वाले नमूनों की संख्या 3.4
नमूनों कीसंख्या
ढेर/बैच
03
5,000 पैकेटोंतक
04
5,001-10,000 पैकेट
05
10,000 पैकेटों से ज्यादा
(घ) भाग घ में, ' जैव उर्वरकों के विश्लेषण की रीतिं शीर्ष के अधीन: -
(i ) 1. ग एजोस्पीरिलम जैव उर्वरकों के विश्लेषण की रीति से संबंधित उपशीर्षक और उससे संबंधित प्रविष्टियों के स्थान पर निम्नलिखित रखा जायेगा , अर्थात
" 1.ग. एजोस्पीरिलमजैव उर्वरकों के विश्लेषण की रीति
साधित्र :राइजोवियम के समान 1.
अभिकर्मक
2.
मीडियम 2.1
एमपीएन ट्यूबों को तैयार करने के लिए निम्नलिखित संमिश्रण के एन मुक्त अर्धठोस मीडियम ( एनएफबी) का प्रयोग करें ।
5.0
डीएल - मैलिक एसिड
0.5
के2एचपीओ 4
0.2
एमजीएसओ 4 7 एच 2 ओ
0.1
एनएसीएल
0.02
सीएसीएल 2
2.0 मि.ली.
ट्रेस एलीमेन्टघोल
4.0मि.ली.
एफईईडीटीए ( 1.64 % घोल)
1.0 मि.ली.
विटामिन घोल
4.0 मि.ली.
के ओ एच 8
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[PART 11-SEC. 3 ( ii )]
2.0मिली.
ब्रोमोथाइमोल ब्लू ( 0.5 % एक्यू)
केओएच के साथ पीएच को
6.8-7.0 तक समायोजित करें
1.75 ग्राम
अर्ध ठोस के लिए अगर मिलाएं
15.0 ग्राम
ठोस माध्यम के लिए अगर मिलाए
2.1.1 ट्रेस एलीमेंट घोल (ग्रा० / ली०)
0.2
एनए 2 एमओओ 4 2 एच 2 ओ
एमएनएसओ 4 एच 2 ओ
0.235
एच 3 बीओ 3
0.28
0.008
सीयूएसओ 4 5 एच 2 ओ
0.024
जेडएनएसओ 4 7 एच 2 ओ
आसवित जल
1000 मि.ली.
एनएफबी माध्यम के एक लीटर में इस घोल का 2 मि.ली. प्रयोग करें ।
विटामिन घोल (ग्रा० /लीटर)
बायोटिन
0.01
पायरिडॉक्सिन
0.02
आसवित जल
1000 मि.ली.
एनएफबी माध्यम के एक लीटर में इस घोल का एक मि.ली. प्रयोग करें ।
2.2 एमपीएन ट्यूबों का विसंक्रमण और तैयारी
2.2.1 पैरा 2.1 में यथा उल्लिखित नाइट्रोजन मुक्त ब्रोमोथाइमोल ब्लू मेलेट मीडियम तैयार करें । अगर को घोलने के लिए उबालें । 15X150 मि.ली. टेस्ट ट्यूब या पेचदार ढक्कन लगी कल्चर ट्यूबों में 10 मि.ली. पिघला हुआ माध्यम तेजी से डालें और रूई के प्लगों या पेचदार ढक्कन से बंद करें । प्रत्येक नमूने के लिए कम से कम ऐसी 25 ट्यूबों की आवश्यकता होगी ।
2.2.2 20 मिनट तक 121 डिग्री सेल्सियस पर आटोक्लेविंग द्वारा ट्यूबों को विसंक्रमित करें जैसा कि पैरा 2.3.2 पर राइजोवियम में है ।
3. एमपीएन काउंट के लिए क्रमिक घोल की तैयारी
30 ग्राम एजोस्पिरिलिम जैव उर्वरकों को 270 मि.ली. आवसित जल में डालें और एक रेसिप्रोकल शेकर पर 10 मिनट तक हिलाएं । क्रमिक घोल को 10 घोल तक बनाएं । 10 से 10 तनुकृत घोल के 1 मि.मी. सम भाग को पिपेट से निकालें और इसे पेचदार ढक्कन वाली ट्यूबों या एन- मुक्त अर्धठोस एनएफबी माध्यम वाली टेस्ट ट्यूबों में डालें ।
9
भारत का राजपत्र असाधारण
[ भाग II-खण्ड 3 ( ii ) ]
4. ट्यूबोंका उष्मांयन
ट्यूबों को लेबल लगाएं और एक टेस्ट ट्यूब स्टैंड में उर्ध्वाधर अवस्था में 3-4 दिन तक 36± 1 डिग्री से० पर उष्मापन करें । उष्मापन की पूरी अवधि के दौरान माध्यम को नहीं छेड़ें ।
5. संगणना
5.1 ऐसी ट्यूबों की संगणना करें जो नीली हो चुकी हों और जिनकी उप सतह पर विशेष श्वेत झिल्ली विकसित हो गई हो ।
5.2 उप सतह पर विशेष श्वेत झिल्ली की बने रहने के लिए ट्यूबों को + (पोजिटिव ) या ( निगेटिव ) के रूप में गिनती करें और गणना के उद्देश्य हेतु विचार करें ।
5.3 एमपीएन काउंट के आकलन की रीति
5.3.1 मूल नमूना में संघटकों की संभाव्य संख्या की गणना करने के लिए कम से कम सान्द्रित घोल में पोजिटिव ट्यूबों की संख्या पी 1 के रूप में चयन करें जिसमें सभी ट्यूब पाजिटिव हो या जिसमें टयूबों की अधिकतम संख्या + ( पोजिटिव ) हो और पी2 और पी3 को अगले दो उच्चतर घोलों में पाजिटिव ट्यूबों की संख्या प्रदर्शित करें ।
5.3.2 उसके पश्चात तालिका 1 में संख्या के क्रम का पता करें जिसमें पी 1 और पी2 प्रायोगिक रूप से अभिप्राप्त मान के सदृश हो । संख्या के उस क्रम को पूरी तालिका से लेकर पी की अभिप्राप्त मान की तालिका तक अनुसरण करें ।
5.3.3 प्रतिच्छेद -बिन्दु पर अंकित आंकड़े द्वितीय घोल में मिश्रित इनोकुलम में प्रदर्शित मूल नमूने की मात्रा में संघटकों की अति संभाव्य संख्या है । एमपीएन मान अभिप्राप्त करने के लिए इस अंक का उचित घोल खण्ड से गुणा करें ।
5.3.4 एजोस्पीरिलम काउंट प्रति वाहक ग्राम = एमपीएन तालिका का मान * X घोल स्तर उत्पाद का शुष्क भाग
3974 GI/2009-2 10
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[PART II-SEC. 3 (ii) ]
तालिका 1
* 10 गुने घोल के साथ प्रयोग के लिए अति संभाव्य संख्या और प्रति घोल 5 ट्यूब ( कोचरान , 1950)
पी3 के सांकेतिक मान के लिए अति संभाव्य संख्या
0
0
0.018 2
3
4
5
0.036
0.018 0.036 0.054
0.072
0.090
0.055
000
0.037
0.055 0.073
0.091
0.11
0.074
0
0.056
0.074 0.092
0.11
0.13
0.093
1234
0
0.075
0.094 0.11
0.13
0.15
0.11
0
5
0.094
0.11 0.13
0.15
0.17
0.13
1
0
0.020
0.040 0.15
0.17
0.19
0.060
1
1
0.040 0.061 0.080
0.10
0.12
0.081
2
1
0.061
0.082 0.10
0.12
0.14
0.10
3
0.089
0.10
0.13
4
1
0.11
0.13 0.12
0.16
0.17
0.16
0.17
0.19
0.15
5
0.13
0.15
0.17
2
0
0.046 0.068 0.17
0.19
0.22
0.19
0.22
0.24
0.091
2
0.068 0.092 0.12
0.14
0.16
0.12
2
2
0.093
0.12
0.14
2
3
0.12
0.14
0.17
2
4
0.15
0.17
0.20
2
5
0.17
0.20
0.23
3
0
0.078
0.11
0.13
1
0.11
0.14
0.17
3
2
0.14
0.17
0.20
3
3
0.17
0.21
0.24
3
4
0.2
0.24
0.28
3
5
0.25
0.29
0.32
0
0.13
0.17
0.21
1
0.17
0.21
0.26
2
0.22
0.26
0.32
4444
4
3
0.27
0.33
0.39
4
4
4
0.34
0.40
0.47
4
5
0.41
0.48
0.56
5
0
0.23
0.31
0.43
5
0.33
0.46
0.64
5
2
0.49
0.70
0.95
?
0.79
1.1
1.4
4
S
1:3
1.7
22
5
5
2.4
3.5
5.4 0.14
0.17
0.19
0.17
0.19
0.22
0.20
0.22
0.25
0.23
0.25
0.28
0.26
0.29
0.32
0.16
0.20
0.23
0.20
0.23
0.27
0.24
0.27
0.31
0.28
0.31
0.35
0.32
0.36
0.40
0.37
0.41
0.45
0.25
0.30
0.36
0.31
0.36
0.42
0.38
0.44
0.50
0.45
0.52
0.59
0.54
0.62
0.69
0.64
0.72
0.81
0.58
0.76
0.95
0.84
1.1
1.3
1.2
1.5
1.8
1.8
2.1
2.5
2.8
3.5
4.3
9.2
16.0 11
भारत का राजपत्र असाधारण
[ भाग II-खण्ड 3 ( ii ) ]
(ii) ' 1.घ फास्फेट विलेय जीवाण्विक जैवउवर्रक के विश्लेषण की रीति से संबंधित " उपशीर्षक में 'प्रक्रिया' से संबंधित ' प्रक्रिया से सम्बन्धित , ' एस्कोरबिक अम्ल का उपयोग करके विलेय फास्फोरस का निर्धारण ,' से संबंधित क्रम संख्या 5 में क्रम संख्या 5.3.3 के अधीन मद (ⅰ ) और मद (ii ) के स्थान पर निम्नलिखित रखा जायेगा, अर्थातः-
(i) नमूनों की तैयारी अगर को छोड़कर ऊपर 2.1 के अनुसार विशुद्ध कल्चर मीडियम । 250 मि० ली. कोनिकल फ्लास्क में , 6 की संख्या में , 100 मि.ली. समभागों में ब्रोथ मीडियम तैयार करें और 20 मिनट तक 121 डिग्री से० पर आटोक्लेव में विसंक्रमित करें ।
(ii ) मीडियम का इनोकुलेशन
इस प्रकार की एक पीएसबी कालानी को चुने जिसे ( घुलनशीलता के पर्याप्त जोन को दर्शाते हुए) पीएसबी के रूप में गिना गया हो और एक पेट्री डिश में 2.1 पर यथा उल्लिखित सेट मीडियम पर रेखा से चिन्हित करें । ब्रोथ को इनोकुलेट करने के लिए इस विशुद्ध कल्चर का प्रयोग करें । 3 फ्लास्कों को इनोकुलेट करें और 3 फ़ास्कों को अनइनोकुलेटेड नियंत्रण के लिए रखें । फ्लास्कों को 12 दिनों तक 28 + 1° से ० पर रोटरी शेकर पर इनक्यूबेट करें । 12 दिनों के बाद प्रत्येक फास्ककी सामग्री को पृथक रूप से वाटमैन न 0 42 छलनी कागज से छानिए या 10,000 आरपीएम पर 15 मिनट तक अपकेन्द्रित करें । 0
(iii) 10 मि.ली. आशोधित/ अपकेन्द्रित सामग्री को 50 मि.ली. ओलसन तत्व में मिलाएं और 30 मिनट तक रोटरी शेकर में हिलाएं ।
(iv) सस्पेंशन को वाटमैन छलनी कागज सं . 40 के माध्यम से छाने । यदि आशोधित सामग्री रंगीन हो जाए तो उसके बाद एक छोटा चम्मच डेक्रो-60 (सक्रिय फास्फोरस मुक्त कॉर्बन) मिलाएं, उसे पुनः हिलाएं और छानें ।
(v) एक 50 मि.ली. अनुमापी फ्लास्क में एक पहचाना हुआ एलीक्वोट (5 से 25 मि.ली. ) सारतत्व लें ।
(vi) पी- नाइट्रोफीनोल सांकेतक की 5 बूंदे मिलाएं ( पानी में 1.5 प्रतिशत घोल) और 2 और 3 के बीच सारतत्व के पीएच को 4 एनएच 2 एसओ 4 की सहायता से संतुलित करें । घोल का पीएच जब 3 हो जाए तो पीला रंग गायब हो जायेगा । सीओ 2 के बनने के साथ घोल के समाप्त होने से बचने के लिए इसे धीरे - धीरे घुमाएं ।
(vii) जब सी ओ 2 का बनना बन्द हो जाए तो फ्लास्क के मुहाने को साफ करें और लगभग 40 मि.ली. तक घोल को तनुकृत करें ।
12
THE GAZETTE OF INDIA : EXTRAORDINARY
[PART 11-SEC. 3(ii) ]
( viii ) एसकोरबिक अम्ल वाले 5 मि.ली. सल्फोमोलिबिडिक अम्ल मिश्रित अभिकर्मक मिलाएं , सामग्री को हिलाएं और आयतन तैयार करें ।
(ix) लाल आशोधक का प्रयोग करते हुए 880 एनएम पर 30 मिनट बाद संचरण को मापें । विकसित हुआ नीला रंग 60 मिनट तक स्थिर रहता है ।
(X) मानक वक्र से सारतत्व रुप में फास्फोरस ( पी) की सान्द्रता दर्ज करें और निम्नानुसार घुलनशील फास्फोरस की सान्द्रता की गणना करें । "
(iii) पैककरना, चिन्ह लगाना, भंडारकरण और उपयोग से संबंधित उपशीर्षक 4 में , -
(i क) 'पैकिंग से संबंधित क्रम संख्या 4.1 में " जैव उवर्रक पालीथीन पैकों में पैक किया जाएगा जिसकी , मोटाई 75- 100 माइक्रोन से कम नहीं होगी " शब्दों के स्थान पर निम्नलिखित शब्द और अंक रखे जाएगें , अर्थात्ः " जैव उर्वरक उचित प्लास्टिक थैलों/ पैकेटों में पैक किया जाएगा जिसकी मोटाई 75-100 माइक्रान से कम नहीं होगी या उचित प्लास्टिक की बोतलों में पैक किया जाएगा । "
( i ख ) ' चिन्ह लगाना ' से संबंधित क्रम संख्या 4.2 में , की प्रविष्टि ( छ ) में , समाप्ति की तारीख जो विनिर्माण की तारीख से 6 माह से अधिक नहीं होगी " शब्दों और अंकों के स्थान पर " समाप्ति की तारीख जो राइजोबियम , एजोटोबैक्टर, एजोस्पीरिलम तथा पीएसबी जैव उर्वरकों के वाहक आधारित चूर्ण/ दानेदार संरचना और तरल आधारित राइजोबियम जैव उर्वरक की दशा में विनिर्माण की तारीख से 6 मास से कम नही होगी , जबकि इसे तरल आधारित एजोटोबैक्टर , एजोस्पीरिलम और पीएसबी जैव उवर्रकों की दशा में विनिर्माण की तारीख से बारह मास से कम नहीं होगी" शब्द रखे जाएगें ।
6. अनुसूची- IV, में
(क) भाग क और उससे संबंधित प्रविष्टियों के स्थान पर निम्नलिखित रखा जाएगा , अर्थात: --
भाग - क
1. सिटी कम्पोस्टः
(i) भार के आधार पर आर्द्रता प्रतिशत
15.0-25.0
(ii) रंग
गहरा भूरा से काला
(i ) गंधा
बुरी गंध से मुक्त
(iv) कण आकार
न्यूनतम 90% सामग्री 4.0 एमएम आईएस छलनी से छन जानी चाहिए ।
< 1.0
3 (७) आयतना घनत्व ( ग्रामः/सीएम)
12.0
( i)) कुल कार्बनिक कार्बन 13
भारत का राजपत्र असाधारण
[ भाग 1]-खण्ड 3 ( ii) ]
भार के आधार पर प्रतिशत, न्यूनतम
(vii) कुल नाइट्रोजन ( एन के रूप में ) 0.8
वजन द्वारा प्रतिशत, न्यूनतम
(viii ) कुल फास्फेट्स ( पी 2 ओ 5 के रूप में) 0.4
भार के आधार पर प्रतिशत, न्यूनतम
( ix) कुल पोटाश (के 2 ओ के रूप में) 0.4
भार के आधार पर प्रतिशत न्यूनतम
(x) सीःएन अनुपात < 20
(xi) पीएच 6.5-7.5
(xii) चालकता (डीएसएम - के रूप में ) से अनधिक 4.0
(xiii ) पैथोजेन्स शून्य
(xiv) भारी धातु वस्तु ( मि.ग्रा. /कि.ग्रा . के रूप में )
भार के आधार पर प्रतिशत , अधिकतम
आर्सेनिक ( एस 2 ओ 3 के रूप में ) 10.00
केडमियम ( सीडी के रूप में ) 5.00
क्रोमियम ( सीआर के रूप में ) 50.00
तांबा ( सीयूके रूप में ) 300.00
मर्करी ( एचजी के रूप में ) 0.15
निकेल ( एनआई के रूप में ) 50.00
सीसा (पीबी के रूप में ) 100.00
जिंक ( जेडएन के रूप में ) 1000.00
2. वर्मी कम्पोस्ट:
(i ) भार के आधार पर आर्द्रता प्रतिशत . 15.0-25.0
(ii) रंग गहरा भूरा से काला
(iii ) गंध बुरी गंध से मुक्त
(iv) कण आकार न्यूनतम 90 % सामग्री 4.0 एमएमआईएस
छलनी से छन जानी चाहिए ।
3
(v) आयतन घनत्व (ग्राम / सीएम ) 0.7-0.9
कुल कार्बनिक कार्बन , 18.0
(vi)
भार के आधार पर प्रतिशत, न्यूनतम
(vii) कुल नाइट्रोजन ( एन के रूप में ) 1.0
14
THE GAZETTE OF INDIA EXTRAORDINARY
भार के आधार पर प्रतिशत , न्यूनतम (viii ) कुल फास्फेट ( पी2 ओ 5 के रूप में ) भार के आधार पर प्रतिशत , न्यूनतम ( ix) कुल पोटाशियम (के 2 ओ के रूप में ) भार के आधार पर प्रतिशत , न्यूनतम (x) भारी धातु वस्तु (मि.ग्रा. / कि.ग्रा . के रूप में) भार के आधार पर प्रतिशत अधिकतम
कैडमियम ( सीडी के रूप में ) क्रोमियम ( सीआर के रूप में ) निकेल ( एनआई के रूप में )
सीसा (पीबी के रूप में )
[PART 11-SEC . 3 ( ii ) ]
0.8
0.8
1
5.0
50.00
50.00
100.00"
(ख) भाग ख में कार्बनिक उर्वरकों की सहन सीमा' , शीर्षक के अधीन यौगिक नाइट्रोजन फास्फोरस और पोटैशियम न्यूट्रैटस के लिए 0.1 यूनिट " शब्दों और अंकों के स्थान पर " नाइट्रोजन , फास्फोरस और पोटैशियम न्यूट्रैटस का कुल योग सिटी कम्पोस्ट में 1.5 % से कम नहीं होगा और वर्मीकम्पोस्ट की दशा में 2.5 % से कम नहीं होगी " शब्द और अंक रखे जाएंगे ।
( ग) भाग घ और उससे संबंधित प्रविष्टियों के स्थान पर निम्नलिखित रखा जाएगा अर्थात् ;
भाग - घ
कार्बनिक उवर्रकों के विश्लेषण की रीति
1. पीएच में का प्राक्कलन
एक सस्पेंशन 50 मि.ली. आशिवत जल में में 25 ग्राम कम्पोस्ट बनाए और 2 घंटे तक रोटरी शेकर पर हिलाएं वुचनर फनेल का प्रयोग करते हुए निर्वात में वाटमैन सं० 1 या समतुल्य छलनी कागज के माध्यम से छाने ।
पीएच मीटर द्वारा आशोधित सामग्री का पीएच अभिनिर्धारित करें ।
15
भारत का राजपत्र असाधारण
[ भाग II-खण्ड 3 ( ii ) ]
2. नमीका प्राक्कलन
रीति:
भारित स्वच्छ , शुष्क पेट्रीडिश में लगभग 5 ग्राम तैयार नमूने को नजदीकी मि.ग्रा . तक तोलें । भार को स्थिर करने के लिए 65 + पर लगभग 5 घंटे तक एक ओवन में गर्म करें , शोषित्र में ठंडा करें और तोलें । नमी मात्रा के रूप में भार में प्रतिशत हानि दर्ज करें ।
संगणनाः
भार के आधार पर नमी प्रतिशत 100 (ख -ग) ख-क
क = पेट्रीडिश का भार
ख = सूखाने से पहले प्रट्रीडिश और सामग्री का भार
ग = सूखने के बाद पेट्रीडिश और सामग्री का भार
3. भारी सघनता का प्राक्कलन
आवश्यकता
100 एम एल का एक मापक सिलेन्डर
भार तुला हाट एयर ओवेन
रबर पैड ( 1 वर्ग फुटः 1 इंच मोटा)
रीति
एक शुष्क 100 एम एल सिलिण्डर को तोल लीजिए (डब्ल्यू 1 गिल)
सिलिण्डर 100 एम एल चिन्ह तक नमूने से भरें । आयतन नोट कीजिए ( वी 1 एमएल )
नमूने के साथ सिलिण्डर को तोल लीजिए ( डब्ल्यू 2 ग्राम)
दो मिनट तक सिलिण्डर को बंद कर दीजिए ।
संघटित आयतन को माप लीजिए ( वी 2 एमएल)
प्राक्कलन
बल्कडेन्सिटी = लिए गए नमूने का भार ( डब्ल्यू 2 - डब्ल्यू 1 ) आयतन (वी 1 - वी 2)
विद्युतकीय चालकता का प्राक्कलन 4.
आवश्यकताएं:
फनेल (ओ डी-75 एमएम )
-250 एमएल फास्क 16
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[PART II-SEC. 3 ( ii) ] - 100 एमएल बीकर
विश्लेषणात्मक तुला
फिल्टर पेपर
-पोटेशियम क्लोराइड ( एआर ग्रेड )
- कन्डक्टिविटी मीटर ( टेम्परेचर कम्पेन्सेशन सिस्टम युक्त)
रीति
2-4 मिमी. की छलनी से कार्बनिक उवर्रक के नए नमूने को छान लीजिए ।
इसमें से 20 ग्राम नमूना लीजिए और 100 एमएल आसवित पानी में मिला लीजिए जिससे इसका अनुपात 1:5हो जाए ।
नियमित अन्तराल पर इसको 1 घंटे तक हिलाते रहें ।
0.01 एम पोटैशियम क्लोराइड विलयन का प्रयोग करते हुए कंडक्टिविटी मीटर को कैलिबरेट कर लीजिए ।
बिना छाने हुए कार्बनिक उवर्रक के सस्पेंशन की कंडक्टिविटी को माप लीजिए ।
संगणना
परिणाम को 25 डिग्री सेंटीग्रेड पर मिलीम्हो या डीएस / ईएम में व्यक्त कीजिए और कार्बनिक उवर्रक सस्पेंशन की सान्द्रता स्पष्ट कीजिए जैसे कि 1 : 5 कार्बनिक उवर्रक सस्पेंशन ।
5. कार्बनिक कार्बन का प्राक्कलन
साधित्र
(i) सिलिका/ प्लेटिनम क्रूसिबिल 25 ग्राम क्षमता
(ii) मफेल फर्नेस
प्रक्रिया
पूर्व भारित क्रूसेवल में 6 घंटे तक ओवन में सुखाते हुए 10 ग्राम नमूने को सही- सही तौलें और 6-8 घंटे तक 650-- 700 सें ० पर छादित भट्टी में सामग्री को सुलगाएं । कक्ष के तापमान को क्रूसिबिल के साथ सामग्री को तोलें । कक्ष के तापमान को ठंडा करें और 12 घंटे तक डिसीकेटर में सुखाएं ।
क्रूसिबिल सहित सामग्री को निम्नलिखित फार्मूले से कुल कार्बनिक कार्बन की गणना करें: -
संगणना
कुल कार्बनिक कार्बन को निम्नलिखित फार्मूले से परिकलित करें : -
=
X100
कुल कार्बनिक सामग्री %
आरंभिक भार- अन्तिम भार
लिए गए नमूने का भार
कुल सी%
=
कुल कार्बनिक सामग्री "
1.724
17
भारत का राजपत्र असाधारण
[ भाग II- खण्ड 3 (ii ) ]
6. कुल नाइट्रोजन का प्राक्कलन
एफसीओ 1985 की अनुसूची- II , भाग ख , 3 (V) में यथावर्णित है
7. सी: एन के अनुपात का प्राक्कलन
रीति
सीः एन अनुपात की संगणना कुल नाइट्रोजन मूल्य में कार्बनिक कार्बन मूल्य का भाग देकर कीजिए ।
8. फास्फोरस का आकलन
नमूना तैयार करना – 50 ग्राम क्षमता सिलिका क्रूसिबिल में 10 ग्राम ओवेन में सुखाए गए नमूने को ठीक- ठीक तोलें और राख प्राप्त करने के लिए इसे 6-8 घंटे तक 650-700 से० पर सुलगाएं । इसे ठंण्डा करें और डेसीकेटर में रखें । 100 मि.ली. बीकर में सामग्री का संचरण करें । 30 मि.ली. 25% एच.सी.एल. मिलाएं । 10 मि.ली. 25% एच सी एल से क्रूसिबिल को दो बार धोएं और सामग्री को बीकर में अन्तरित करें । गर्म प्लेट पर 10-15 मिनट तक गर्म करें । 4 घंटे तक रखें । वॉट मैन सं ० 1 छलनी कागज के माध्यम से छानें । ( अम्ल विहीन होने तक ) 4-5 बार आसवित जल से धोएं ।
एक आंयतनी प्लास्क में 250 मि० ली० का आशोधित सामग्री का आयतन बनाएं ।
एफ.सी.ओ. 1985 की अनुसूची- II भाग ख 4 (II ) के अधीन यथा निर्धारित ग्रेवीमिट्रिक क्यूनोलाइन मोलीबिडेट रीति से कुल पी का प्राक्कलन करें ।
9. पोटेशियम का आकलन
फ्रेम फोटोमिट्री रीति: - कुल पोटैशियम का अवधारण 650-700 डिग्री सेंटीग्रेड ताप पर ड्राई एशिंग करके तथा सान्द्र हाइड्रोक्लोरिक अमल में विलयन तैयार करके किया जाता है ।
(1 ) पोटैशियम क्लोराइड मानक विलयनः 1 लीटर आसवित जल में 1.909 ग्रा० ए आर श्रेणी के पोटैशियम क्लोराइड ( 1 घंटे तक 60 डिग्री सेन्टीग्रेट पर सुखाया हुआ ) 1000 पीपीएम के का स्टॉक विलयन तैयार कीजिए । 1000 पीपीएम विलयन में से 100 एमएल वियलन मिलाकर 1 लीटर निष्कर्षित विलयन के साथ 100 पीपीएम मानकर विलयन तैयार कीजिए ।
(2) मानक वक्रः 100 पीपीएम मानक विलयन में से 0,5 , 10 , 15 और 20 एमएल पिपेट से लेकर 100 एमएल वाल्यूमिट्रिक प्लास्कमें मिला लीजिए ताकि इसका आयतन चिन्ह तक पहुंच पाए । अब इसमें क्रमशः 0,5, 15 तथा 20 पीपीएम के उपस्थित हैं ।
प्रक्रिया
* एक पोर्सिलीन की कटोरी में 5 ग्राम नमूना ले लीजिए और मफेल फर्नेस में पदार्थ को 650-700 सेंटीग्रेड पर गरम करके राख तैयार कर लीजिए ।
i
3974GI/2009-3 18
THE GAZETTE OF INDIA : EXTRAORDINARY
[PART II- SEC . 3( ii) ]
* इसे ठंढ़ा कर लीजिए और 5 एमएल सान्द्र हाइड्रोक्लोरिक एसिड में घोल लीजिए । इसे 250 एमएल के बीकर में डालकर आसवित जल से कई बार धो लीजिए और फिर इसको गर्म करिये । फिर इसे 100 एमएल अनुमापी फ्लास्क में रखकर आयतन माप लीजिए ।
* यदि जरूरी हो तो विलयन को छान लीजिए और छने हुए भाग में आसवित जल मिलाकर इसे इतना पतला करिये कि प्रयोग किए जाने वाले विलयन में के की मात्रा 0 से 20 पीपीएम हो जाए ।
* उपकरण को ठीक तथा संतुलित करने के पश्चात के फिल्टर का प्रयोग करते हुए फ्लेम फोटोमीटर द्वारा के का मापन करिए ।
* प्लेम फोटोमीटर में मानक विलयन में के की विभिन्न सान्द्रता को इसी प्रकार पढिए और के की विभिन्न सांद्रता को पढ़ते हुए प्लोटिंग द्वारा मानक वक्र तैयार कीजिए ।
संगणना- पोटाश ( के ) भार के अनुसार प्रतिशत = आर X20X तनु बनाने वाले कारक जहां आर = नमूना विलयन में के का आरपीपीएम (मानक वक्र में अतिरिक्त निर्देशांकन से अभिप्राप्त)
" 10. कैडमियम, तांबा, क्रोमियम, सीसा, निकेल और जस्ते का प्राक्कलन
अपेक्षित सामग्री
1 . ट्राईएसिड मिश्रणः 10 भाग एचएन ओ 3 ( नाइट्रिक अम्ल)
1 भाग एच 2 एसओ 4 ( सल्फ्यूरिक अम्ल) और 4 भाग एचसीएल ओ 3 ( परक्लोरिक अम्ल) मिलाएं ।
कोनिकलफास्क, 250 एमएल 2.
3. de de
4. पाटमैन फिल्टर पेपर न 0 42
5. टोमिक एब्जार्क्सन स्पेक्ट्रोफोटोमीटर ( एएएस )
नने का प्रसंस्करण
ओवन मे ( 105 डिग्रीसेंटीग्रेड) सुखाए गए नमूने का 5.0 ग्राम या उपयुक्त मात्रा, जो कि पूरी तरह पिसी हो और 0.2 एमएम छलनी से छानी गई हो , को एक कोनिकल प्लास्क में ले लीजिए ।
30 एमएल ट्राईएसिड मिश्रण ले लीजिए और इसे रीफिक्सिग हेतु छोटे ग्लास फनेल से ढ़क लीजिए । नमूने को हाट प्लेट पर 200 डिग्रीसेंटीग्रेड तक गरम करिये जिससे कि विलयन लगभग आधा हो जाए और सफेद अवक्षेप बैठ जाए ।
ठढ़ा करके हाटमैन न 0 42 फिल्टर पेपर से नमूने को प्रछानकर अनुमापी फ्लास्क में 100 एमएल मिश्रण ले लीजिए ।
19
भारत का राजपत्र असाधारण
[ भाग II-खण्ड 3 ( ii ) ]
कार्यगत मानकों की तैयारी
कैडमियम - एफसीओ ( 1985) की अनुसूची- II , भाग ख , 8 (x) में यथा उल्लिखित
तांबा- एफसीओ ( 1985 ) की अनुसूची- II , भाग ख , 8 (iv) में यथाउल्लिखित
क्रोमियम - आयतनी फ्लास्क में 199 पीपीएम क्रोमियम मानक के 1,2,3 और 4 मि.ली. को दुगने आसवित जल में घोलें और 1,2,3 4 पीपीएम की सान्द्रताओं वाले मानक अभिप्राप्त करने के लिए 100 मि.ली. का आयतन तैयार करें सीसा- एफसीओ ( 1985) की अनुसूची- II , भाग ख 8 (v) में यथाउल्लिखित
निकल - आयतनी प्लास्क में 199 पीपीएम निकल मानक के 1,2,3 और 4 मि.ली. को दुगने आसवित जल में घोलें और 1,2,3 और 4 पीपीएम की सान्द्रताओं वाले मानक अभिप्राप्त करने के लिए 100 मि.ली. का आयतन तैयार करें ।
जस्ता- एफसीओ ( 1985) की अनुसूची- II , भाग ख 8 (ii ) में यथाउल्लिखित
परिणामों का मापन
उपकरण के लिए दी गई प्रक्रिया के अनुसारं एटोमिक एब्जासन स्पेक्ट्रोफोटोमीटर ( एएएस ) का प्रयोग करते हुए सीडी, सीयू, सीआर , एफई , पीबी, एनआई , जेडएन धातु की सान्द्रताओं का आकलन मानक घोल और नमूनों को आग द्वारा किया जाए । यही प्रक्रिया अपनाते हुए ब्लैंक परीक्षण कीजिए ।
परिणामों को व्यक्त करना
धातु की सान्द्रता को 3 डेसीमल यूनिटों में भार के आधार पर ओवन में सुखाए जाने के बाद मि.ग्रा. /ग्राम के आधार पर व्यक्त कीजिए ।
(सन्दर्भ- मैन्यूअल फार एनलिसिस ऑफ म्यूनिसिपल सालिड वेस्ट ( कम्पोस्ट) : (केन्द्रीय प्रदूषण नियंत्रण बोर्ड) " बोर्ड ।
11. ' पारा का प्राक्कलन
अभिकर्मक
(क) सान्द्रित नाइट्रिक अम्ल ( एचएन ओ 3 )
(ख ) सान्द्रित सल्फ्यूरिक अम्ल ( एच 2 एस ओ 4)
(ग) पोटैशियम परसल्फेट ( 5% विलयन ): 1 लीटर आसवितत जल में 50 ग्राम के 2 एस 2 ओ 8 का घोल तैयार करिये ।
(घ) पोटैशियम परमैंगनेट ( 5 %विलयन): एक लीटर आसवित जल में 50 ग्राम केएमएन ओ 4 का घोल तैयार कीजिए
(ड. ) हाइड्राक्सीलेमाइन सोडियम क्लोराइड विलयनः 1 लीटर आसवित जल में 120 ग्राम हाइड्राक्सिल माइन साल्ट और 120 ग्राम सोडियम क्लोराइड ( एनएसीएल ) का घोल तैयार कीजिए ।
20
THE GAZETTE OF INDIA : EXTRAORDINARY
[PART II-SEC . 3 (ii ) ]
(च) स्टैनस क्लोराइड ( 20 % ): 100 एमएल आसवित जल में 20 ग्राम एसएनसीएल 2 का घोल तैयार कीजिए ।
अपेक्षित सामग्री
(क) वाटर बाथ
(ख) क्लेमलेस एटोमिक एब्जार्क्सन स्पेक्ट्रोफोटोमीटर या कोल्ड वेपर मर्करी एनलाइजर
(ग) बीओडी बाटल , 300 एमएल
नमूने का प्रसंस्करण
(क) 5 ग्राम नमूना लेकर ( जो पूरी तरह पिसा हो और सूखा न हो ) ओवन में 105 से 0 पर 8 घंटे तक गर्म करिये ताकि नमी का आकलन किया जा सके ।
(ख ) 5 ग्राम का दूसरा नमूना ( जो पूरी तरह पिसा हो और सूखा न हो ) एक बीओडी बाटल में लीजिए इसमें 2.5 एमएल कोन , एच एन ओ 3+ मि.ली. कोन , एच 2 एसओ 4 और 15 एमएल 5 % केएमएन ओ 4 मिलाइए ।
(ग) 15 मिनट बाद 8 एमएल 5 % के 2 एस 2 ओ 8 मिलाइए ।
(घ) बाटल को ढक्कन से बंद कर दीजिए और इसे 95 डिग्रीसेंटीग्रेड पर 2 घंटे तक वाटर बाथ में रखिये ।
(ड. ) कमरे के ताप तक ठण्डा करके इसमें 5 एमएल हाइड्राक्सीलेमाइन सोडियम क्लोराइड विलयन मिलाइये ।
मापन :
एक कोल्डवेपर मर्करी एनेलाइजर का प्रयोग करके, रीडिंग लेने के तत्कालपूर्व 20 % एसएनसीएल 2 का 5 एमएल के साथ रखे गए नमूने में कमी निकाली जाती है ।
परिणामोंको व्यक्त करना :
पारे की सांद्रता को 3 डेसीमल ईकाई में ओवन में शुष्क भार के आधार पर मि.ग्राम / ग्राम में व्यक्त करिए । ( सन्दर्भः मैन्यूअल फार एनेलिसिस आफ म्यूनिसिपल सोलिड वेस्ट ( कम्पोस्ट) केन्द्रीय प्रदूषण नियंत्रण बोर्ड)
" 12. आरसेनिक का प्राक्कलन
नमूने का प्रसंस्करण - एक बीकर में 10 ग्राम पूर्णतः शुद्ध नमूनें को 30 मि.ली. एक्वारेजिया ( एचएनओ 3 + एचसीएल 1: 3 के अनुपात में) प्रवाहित करें । नम काले अवशेष के अभिप्राप्त होने तक इसे गर्म प्लेट पर रखें ( सुखाएं नहीं) । 5 मि.ली. एक्कारेजिया मिलाएं और अवशेष के आन्द्र होने तक गर्म प्लेट पर सूखने दें । 30 मि.ली. सान्द्रित एचसीएल में अवशेष को घोलें और 100 मि.ली. आयतनी फास्क में वाट मैन सं० 1 छननी कागज के माध्यम से छानें । छननी कागज को दुगने आसवित जल से 3-4 बार धोएं । 100 मि.ली. का आयतन तैयार करें । 100 मि.ली. आयतनी फास्क में इस घोल का मि.ली. भाग ले और इसमें 5 मि.ली. सान्द्रित एच सी एल और 2 ग्राम के एलएन मिलाएं तथा 100 मि.ली. का आयतन तैयार करें ।
21
भारत का राजपत्र असाधारण
[भाग II-खण्ड 3 ( ii ) ]
आयतनीफास्कमे दुगने आसवित जल के साथ मानक आरसेनिक घोल के क्रमशः 0.05 , 0.1 और 0.2 मि.ली. भाग को मिलाते हुए 0.05 , 0.1 और 0.2 पीपीएम की सान्द्रता वाले मानक को तैयार करें ।
मापन - उपकरण संबंधी दी गई प्रक्रिया के अनुसार एटोमिक अबजोरप्सन स्पेक्ट्रोफोटोमीटर के साथ जुड़े वाष्प रचना संग्रहण का प्रयोग करके आरसेनिक का प्राक्कलन करें ।
13. पैथोजेनिसिटी परीक्षण
साधित्र
1. कम्पोस्टके नमूने
2. सिंगल और डवल स्ट्रेन्थ वाला लैकटोस ब्राथ
3. कल्चर ट्यूब
4. डरहम ट्यूब
5. बुन्सेन बर्नर
6. विसंक्रमण पीपेट्स
7. इन्क्यूबेटर आटोक्लेव्स
8. पेट्री- प्लेटस
9. इनोकुलेशन लूप्स
कल्चर मीडिया तैयार करना
क. संभावित परीक्षण के लिए
1. लैक्टोस ब्राथ
6.0ग्राम
बीफ निष्कर्षण
10.0 ग्राम
पेप्टोन
10.0 ग्राम
लैक्टोस
1000 एम.एल.
डी.डब्ल्यू
ख. पुष्टिकारक परीक्षण के लिए
1. इयोसाइन मिथीलीन ब्लूअगर मीडिया (इएमबी मीडिया)
10.0 ग्राम
पेपटोन
5.0 ग्राम
लैक्टोस
5.0 ग्राम
सुकरोस
2.0 ग्राम
के2एचपीओ 4
0.4ग्राम
इयोसाइनवाई
0.06 ग्राम
मिथीलीन ब्लू
15.0 ग्राम
अगर
1000 एम.एल.
डी डब्ल्यू 22
THE GAZETTE OF INDIA : EXTRAORDINARY
[PART II-SEC. 3 (ii ))
ग. पूर्ण परीक्षणके लिए
1. पोषणिक अगर
बीफ इक्सट्रेक्ट
3.0 ग्राम
पेपटोन
5.0 ग्राम
प्रक्रिया
क. संभावित परीक्षण
1. प्रत्येक नमूने के लिए लैक्टोस ब्राथ के 12 ट्यूब तैयार करें और ट्यूब को काटन प्लग्स / कैप्स से बन्द करें और 20 मिनट तक 121 से० पर आटोक्लेव करें ।
2. विसंक्रमित आवसित जल से डूरहम ट्यूब को भरें और बीकर में रखें और 20 मिनट तक 121 से ० पर आटोक्लेव करें ।
3. 270 मि.ली. विसंक्रमित आसवित जल में 30 ग्राम कम्पोस्ट के नमूने प्रवाहित करें और अनुसूची III , भाग घ, -4 एफसीओ ( 1985 ) के क्रम सं ० 3 के अनुसार 10 घोल तक क्रम से मिलाते रहें ।
3-4 4. प्रत्येक घोल के लिए 3 ट्यूबों में 10 से 10 तक 1 मि.ली. मात्रा प्रवाहित करें ।
5. आसवित जल से भरे हुए डरहम ट्यूब को प्रत्येक ट्यूब में उल्टी अवस्था में रखे और ट्यूब को पुनः बन्द कर दें 6. ट्यूब को इक्यूवेटर में 24 घंटे तक 36 से ० तक इनोकुलेट करें ।
परिणाम
24 घंटे में गैस का उत्पादन- नमूने में कोलीफार्म की उपस्थिति की पुष्टि करता है ।
48 घंटे में गैस का उत्पादन- संदेहास्पद परीक्षण
नकारात्मक परीक्षण कोई गैस का उत्पादन नहीं-
ख. पुष्टिकारक परीक्षण
अभिपुष्टिकरण परीक्षण गैर कोलीफार्मस से कोलीफार्म और ग्राम निगेटिव तथा ग्राम पाजिटिव बैक्टीरिया को अन्तर करने में सहायक होता है । इस परीक्षण में ई . एम. बी. अगर प्लेट नमूने के साथ गैस उत्पन्न करने वाले धनात्मक ट्यूबों से इनोकुलेट किए जाते हैं । डार्क सेन्टर वाली छोटी कालोनियों के पैदा होने से ग्राम निगेटिव शर्करा किण्वन कोलीफार्म बैक्टीरिया की उपस्थिति की पुष्टि होती है । कभी- कभी कुछ गैर कोलीफार्म गैस भी उत्पन्न करते हैं इसलिए यह परीक्षण आवश्यक है ।
1. अनुसूची III , भाग घ , पैराग्राफ 2.3.3 से 2.3.6 पर दिए गए विधि के अनुसार ई. एम बी अगर प्लेटों का मिश्रण के साथ तैयार करें ।
2. संभावित परीक्षण में धनात्मक / संदेहास्पद परीक्षणों को दर्शाने वाले नमूनों को चिन्हित करके इनोकुलेशन परिपथ की मदद से प्लेटों को इनोकुलेट करें ।
23
भारत का राजपत्र असाधारण
[ भाग II- खण्ड 3 (ii ) ]
3. इनक्युबेटर में प्लेटों को 12 घंटे तक 0 तक 30 + 1 से० पर गर्म करें ।
4. डार्क सेंन्टर्ड या न्यूक्लियेटेड कालोनियां प्रगट होती हैं जो कालोनियों के आकार तथा धातुगत शीन के आधार पर इ ० कोली तथा इ एरोजीन्स के बीच अन्तर स्पष्ट कर सकती है ।
परिणामः
इस मीडियम पर इ ० कोली कालोनियां छोटी होती हैं जिसमें धातुगत शीन पाए जाते हैं जबकि ई ० एंरोजीन्स कालोनियां सामान्यतः बड़ी होती है और इनमे शीन का अभाव होता है ।
ग. पूर्ण परीक्षण
आगे के अभिपुष्टिकरण के लिए इस परीक्षण की जरूरत होती है ।
प्रक्रिया
1. ई . एम. बी अगर प्लेट से एकल कालोनी लें ।
2. इसे लैक्टोस ब्राथ में इनोकुलेट करें और पौषणिक अगर स्लान्ट पर चिन्हित करें ।
3. स्लान्टों को गर्म करें ।
4. इसके विकसित होने के बाद ग्राम के प्रतिक्रिया का कार्य करें ।
परिणाम
बैक्टीरिया की ग्राम निगेटिव प्रकृति पाजिटिव पूर्ण परीक्षण का सांकेतक है ।
[फा. सं. 2-2/2009 उर्वरक विधि ]
पंकज कुमार , संयुक्त सचिव टिप्पण : मूल आदेश भारत के राजपत्र , भाग II खण्ड ( 3 ) , उप- खण्ड ( i ) में संख्या सा.का.नि. 758 (अ ) तारीख 25 सितम्बर , 1985 द्वारा प्रकाशित किया गया था और तत्पश्चात् निम्नलिखित द्वारा संशोधन किया गया :-
1. सा.का.नि. 201 (अ ) तारीख 14 फरवरी , 1986
2.सा.का.नि. 508(अ ) तारीख 19 मार्च , 1986
3.सा.का.नि. 1160 (अ ) तारीख 21 अक्तूबर , 1986
4.का.आ. 822 (अ ) तारीख 14 सितम्बर , 1987
5.का.आ. 1079(अ ) तारीख 11 दिसम्बर , 1987
6.का.आ. 252 (अ ) तारीख 11 मार्च , 1988
7.का.आ. 724(अ) तारीख 28 जुलाई , 1988
8.का.आ. 725 (अ ) तारीख 28 जुलाई , 1988 24
THE GAZETTE OF INDIA : EXTRAORDINARY
[PART II-SEC . 3 (ii ) ]
9.का.आ. 940 (अ ) तारीख 11 अक्तूबर , 1988
10.का.आ. 498 (अ ) तारीख 29 जून , 1989
11. का.आ. 581 (अ ) तारीख 27 जुलाई , 1989
12.का.आ. 673 (अ ) तारीख 25 अगस्त, 1989
13. का.आ. 738 (अ ) तारीख 15 सितम्बर , 1989
14.का.आ. 140 (अ ) तारीख 12 फरवरी , 1990
15. का.आ. 271 (अ ) तारीख 29 मार्च , 1990
16.का.आ. 403 (अ ) तारीख 23 मई , 1990
17.का.आ. 675 (अ ) तारीख 31 अगस्त, 1990
18. का.आ. 261 (अ ) तारीख 16 अप्रैल , 1991
19. का.आ. 444(अ ) तारीख 2 जुलाई , 1991
20.का.आ. 530 (अ ) तारीख 16 अगस्त, 1991
21.का.आ. 795(अ ) तारीख 22 नवम्बर, 1991
22.का.आ. 377 (अ ) तारीख 29 मई , 1992
23.का.आ. 534 (अ ) तारीख 20 जुलाई , 1992
24.का.आ. 826 (अ ) तारीख 9 नवम्बर , 1992
25.का.आ. 254(अ ) तारीख 3 जून , 1993
26.का.आ. 397 (अ) तारीख 18 जून , 1993
27.का.आ. 942(अ ) तारीख 10 दिसम्बर , 1993
28.का.आ. 163 (अ) तारीख 14 फरवरी , 1994
29.का.आ. 340 (अ) तारीख 17 अप्रैल , 1995
30. का.आ. 459 (अ ) तारीख 22 मई , 1995
31. का.आ. 835(अ) तारीख 12 अक्तूबर , 1995
32.का.आ. 575(अ ) तारीख 20 अगस्त, 1996
33.का.आ. 57 (अ ) तारीख 22 जनवरी , 1997
34. का.आ. 329 (अ) तारीख 12 मई , 1999
35.का.आ. 1068 (अ ) तारीख 4 नवम्बर , 1999
36. का.आ. 49(अ ) तारीख 16 जनवरी , 2003
37.का.आ. 373 (अ) तारीख 1 अप्रैल , 2003
38.का.आ. 413 (अ ) तारीख 7 अप्रैल , 2003
39.का.आ. 540 (अ ) तारीख 4 मई , 2003
40.का.आ. 342(अ ) तारीख 18 मार्च , 2005
41.का.आ. 1772(अ ) तारीख 17 अक्तूबर , 2006
42.का.आ. 2164 (अ ) तारीख 28 दिसम्बर , 2007 25
भारत का राजपत्र असाधारण
[ भाग II-खण्ड 3 ( ii) ]
43.का.आ. 837(अ ) तारीख 10 अप्रैल , 2008
44.का.आ. 1741(अ) तारीख 22 जुलाई, 2008
45. का.आ. 401 (अ) तारीख 5 फरवरी , 2009
46. का.आ. 1214(अ ) तारीख 14 मई , 2009
MINISTRY OF AGRICULTURE
(Department of Agriculture and Cooperation)
ORDER
New Delhi , the 3rd November , 2009
S.O. 2803 (E) . In exercise of the powers conferred by section 3 of the Essential Commodities Act, 1955 (10 of 1955) , the Central Government hereby makes the following Order further to amend the Fertiliser ( Control ) Order , 1985, namely: -
1. ( 1 ) This Order may be called the Fertiliser (Control) Third Amendment Order, 2009.
(2) It shall come into force on the date of its publication in the Official Gazette.
2. In the Fertiliser (Control) Order , 1985, -
(1 ) in clause 8, in sub-clause 3 , after the 4th proviso, the following provisos shall be inserted, namely: -
"Provided also that where the manufacturer of organic fertilizer is a State Government or municipality , it shall not be necessary for it to obtain the authorisation letter:
Provided also that where the manufacturer of vermi -compost, other than a State Government or municipality, has annual production capacity less than 50 metric tonnes , it shall not be necessary for him to obtain the authorisation letter".
(2) in clause 14, after sub- clause (3 ) , the following provisos shall be inserted at the end, namely: - ১
"Provided that where the manufacturer of organic fertilizer is a State Government or a municipality, it shall not be necessary for it to obtain the Certificate of Manufacture:
Provided further that where the manufacturer of vermi -compost, other than a State Government or municipality, has annual production capacity less than fifty metric tonnes , it shall not be necessary for him to obtain the Certificate of Manufacture for preparation of vermi -compost."
(3) in clause 19, the following provisos shall be inserted at the end, namely:-
3974Gl /2009-4 26
THE GAZETTE OF INDIA : EXTRAORDINARY
[PART II-SEC. 3( ii ) ]
"Provided that specifications of city compost in Schedule IV shall, in case of municipalities , be applicable only when it is traded in packaged form for use in agriculture:
Provided further that the specifications of vermi -compost in Schedule IV shall be applicable only in such cases where it is sold in packaged form and for agricultural purposes ."
(4) in Schedule I , in Part A, under the heading ' Specification of Fertilizers ", -
(a) under sub-heading 1 (c) relating to ' Straight Potassic Fertilisers ' , after serial number 4 and entries relating thereto , the following serial number and entries shall be inserted, namely: -
"5. Potash derived from molasses
(i) Moisture, per cent by weight, maximum
4.79 (ii)
1.66 Total nitrogen, per cent by weight, minimum
( iii) Neutral ammonium citrate soluble phosphate (as P2O5) per cent by weight, minimum
0.39
(iv)
14.70";
Water soluble potash ( as K2O ) , per cent by weight , minimum
(b) in sub-heading 1 (e) relating to ' N.P.K. Complex Fertilisers ' , after serial number 12 and entries relating thereto , the following serial number and entries shall be inserted, namely: -
" 13. Ν.Ρ.Κ. ( 12:11:18 with MgO)
(i)
1.5 Moisture, per cent by weight , maximum
( ii)
12.0 Total nitrogen, per cent by weight, minimum
(iii)
7.0 Ammonical nitrogen, per cent by weight, minimum
(iv)
5.0 Nitrate nitrogen, per cent by weight, minimum
(v)
Neutral ammonium citrate soluble phosphate ( as P2O5) per cent by weight, minimum
11.0
(vi) Water soluble phosphates (as P2O5 ), per cent by weight, minimum 7.7 (vii)
18.0 Water soluble potash (as K2O) , per cent by weight , minimum
1.20 (viii) Magnesium (as Mg) per cent by weight , minimum
(ix)
7.6 Sulphur (as S) , per cent by weight , minimum
(x)
1.0 Total Chlorides (as Cl ) , percent by weight , maximum
(xi)
Particle size - Not less than 90 per cent of the material shall pass through 4mm IS sieve and be retained on 1 mm IS sieve and not more than 5 per cent shall be below 1 mm IS sieve " ;
(5) in Schedule III , - 27
भारत का राजपत्र असाधारण
[भाग II-खण्ड 3(ii ) ]
(a) for Part A, and entries relating thereto, the following shall be substituted, namely: -
"PART - A
SPECIFICATIONS OF BIOFERTILISERS
Rhizobium
1.
(i) Base
(ii) Viable cell count
Contamination level (iii)
(iv) pH
(v)
= Carrier based in form of moist/dry powder or granules, or liquid based
CFU minimum 5x10 " cell/g of powder , granules or carrier material or 1x10 = cell/ml of liquid.
No contamination at 10º dilution
= 6.5-7.5
All material shall pass through 0.15- 0.212 mm IS sieve
Particle size in case of carrier = based material
=
30-40%
(vi) Moisture percent by weight, maximum in case of carrier based
(vii) Efficiency Character
*Type ofcarrier:
= Should show effective nodulation on all the species listed on the packet.
The carrier material such as peat, lignite, peat soil, humus , wood charcoal or similar material favoring growth of the organism.
2. Azotobacter
Base
(i)
Viable cell count (ii)
Contamination level (iii)
(iv) pH
(v)
Carrier based in form of moist/dry
powder or granules, or liquid based
= CFU minimum 5x10' cell/g of carrier material or 1x 10º cell/ml of liquid.
= No contamination at 10 dilution
= 6.5-7.5
All material shall pass through 0.15- 0.212 mm IS Sieve
Particle size in case of carrier basedmaterial
(vi)
= 30-40%
Moisture percent by weight, maximum
(vii) Efficiency character
*Type of carrier:
= The strain should be capable of fixing at least 10 mg of nitrogen per g of sucrose consumed
The carrier material such as peat, lignite , peat soil, humus , wood charcoal or similar material favoring growth of the organism.
3. Azospirillum 28
THE GAZETTE OF INDIA : EXTRAORDINARY
[PART 11-SEC . 3 (ii ) ]
Base
(i)
= Carrier based in form of moist/dry powder or granules , or liquid based
(ii) Viable cell count
CFU minimum 5x10 cell/g of powder/granules or carrier material or 1 x108 cell/ml of liquid.
(iii) Contamination level
= No contamination at 10º dilution
(iv) pH
= 6.5-7.5
(v) Particle size in case of carrier based material
= All material shall pass through 0.15- 0.212 mm IS Sieve
(vi)
= 30-40%
Moisture percent by weight, maximum in case of carrier based
(vii) Efficiency character
= Formation of white pellicle in semisolid Nitrogen free bromothymol blue media.
*Type of carrier:
The carrier material such as peat , lignite , peat soil , humus , wood charcoal or similar material favoring growth of the organism .
4. Phosphate Solubilising Bacteria
Base
(i)
= Carrier based in form of moist/dry powder or granules , or liquid based
(ii) Viable cell count
= CFU minimum 5x10 cell/g of carrier material or 1x108 cell/ml of liquid material .
(iii) Contamination level
= No contamination at 10º dilution
(iv) PH
= 6.5-7.5 for moist/dry powder granulated carrier based and 5.0-7.5 for liquid based.
(v) Particle size in case of carrier based material
= All material shall pass through 0.15- 0.212 mm IS Sieve
(vi)
= 30-40%
Moisture percent by weight , maximum in case of carrier based
(vii) Efficiency Character
= The strain should have phosphate solubilizing capacity in the range of minimum 30%, when tested spectrophotometrically. In terms of zone formation, minimum 5 mm solubilization zone in prescribed media having at least 3 mm thickness .
*Type of carrier:
The carrier material such as peat, lignite, peat soil , humus , wood charcoal or similar material favoring growth of the organism" ;
29
भारत का राजपत्र असाधारण
[भाग II-खण्ड 3 (ii ) ]
(b). in Part B , under the heading ' Tolerance Limit of Biofertilizers ' , for the figures and words " 5x10 CFU/g of carrier or per ml of liquid material " , the figures and words "1x107 CFU/g of carrier material in form of powder or granules or 5x107 CFU /gm of liquid material " , shall be substituted;
(c) for Part C and entries relating thereto the following shall be substituted namely, under the heading
" PART C
' PROCEDURE FOR DRAWAL OF SAMPLE OF BIOFERTILISERS -
PROCEDURE FOR SAMPLING OF BIOFERTILIZERS ' , -
" 1. General Requirements of Sampling
1.0 In drawing , preparing and handling the samples , the following precautions and directions shall be observed.
1.1 Sampling shall be carried out by a trained and experienced person as it is essential that the sample should be representative of the lot to be examined.
1.2 Samples in their original unopened packets should be drawn and sent to the laboratory to prevent possible contamination of sample during handling and to help in revealing the true condition of the material .
1.3 Intact packets shall be drawn from a protected place not exposed to dampness, air, light, dust or soot . "
2. Scale of Sampling
2.1 Lot
All units (containers in a single consignment of type of material belonging to the same batch of manufacture) shall constitute a lot . If a consignment consists of different batches of the manufacture the containers of the same batch shall be separated and shall constitute a separate lot .
2.2 Batch
All inoculant prepared from a batch fermentor or a group of flasks (containers) constitute a batch.
2.3 For ascertaining conformity of the material to the requirements of the specification, samples shall be tested from each lot separately .
2.4 The number of packets to be selected from a lot shall depend on the size of the lot and these packets shall be selected at random and in order to ensure the randomness of selection procedure given in IS 4905 may be followed. " 30
THE GAZETTE OF INDIA : EXTRAORDINARY
[PART II-SEC. 3( ii)]
"3. Drawal of Samples
3.1 The Inspector shall take three packets as sample from the same batch . Each sample constitutes a test sample.
3.2 These samples should be sealed in cloth bags and be sealed with the Inspector's seal after putting inside Form P. Identifiable details such as sample number, code number or any other details which enable its identification shall be marked on the clothbags.
:
3.3 Out of the three samples collected, one sample so sealed shall be sent to incharge ofthe laboratory notified by the State Government under clause 29 or to National Centre for Organic Farming or to any of its Regional Centres . Another sample shall be given to the manufacturer or importer or dealer as the case may be . The third sample shall be sent by the inspector to his next higher authority for keeping in safe custody . Any of the latter two samples shall be sent for referee analysis under sub- clause (2) of clause 29B .
3.4 The number of samples to be drawn from the lot
Lot/Batch
Number of Samples
Upto 5,000 packets
03
5,001-10,000 packets
04
More than 10,000 packets
05
(d) In Part D, under the heading ' Method of Analysis of Biofertilisers ' , -
(i) for sub -heading ' 1.C relating to Method of Analysis of Azospirillum Biofertilisers ' and entries relating thereto, the following shall be substituted, namely: -
" 1.C. Method of Analysis of Azospirillum Biofertilisers
1. Apparatus: same as Rhizobium
2. Reagents
2.1 Medium 31
भारत का राजपत्र असाधारण
[भाग II-खण्ड 3( ii) ]
Use N- free semisolid medium (Nfb) of the following composition for preparation of MPN tubes
5.0
DL-Malic acid
0.5
K2HPO4
0.2
MgSO4 7H2O
0.1
NaCl
0.02
CaCl2
2.0 ml
Trace element Soln.
4.0 ml
Fe EDTA ( 1.64 % Soln. )
1.0 ml
Vitamin soln.
4.0 ml
KOH
2.0 ml
Bromothymol blue (0.5% aq.)
Adjust pH to 6.8-7.0 with KOH
1.75 g
For semi solid add agar
15.0 g
For solid medium add agar
2.1.1 Trace element solution (g/litre)
0.2
Na2MoO4 2H2O
MnSO4 H2O
0.28
H3BO3
0.008
CuSO4 5H2O
0.024
ZnSO4 7H2O
1000 ml
Distilled water
Use 2 ml of this solution in one litre of Nfb media
Vitamin solution (g/litre)
0.235 id
0.01
Biotin
0.02
Pyridoxin
1000 ml
Distilled water
Use one ml of this sol . in one litre of Nfb media
2.2 Sterilization and preparation ofMPN tubes
2.2.1 Prepare Nitrogen free Bromothymol Blue malate medium as mentioned at paragraph 2.1 . Boil to dissolve agar . Quickly dispense 10 ml molten media in 15 x 150 ml test tubes or screw capped culture tubes and close either with cotton plugs or screw caps . Minimum of 25 such tubes shall be needed for each sample.
2.2.2 Sterilize the tubes by autoclaving at 121 ° C for 20 minutes, as in Rhizobium at paragraph 2.3.2.
32
THE GAZETTE OF INDIA : EXTRAORDINARY
[PART II-SEC. 3 (ii) ]
3. Preparation ofserial dilution for MPN count
Dispense 30 g of Azospirillum biofertilizers in 270 ml of sterile water and shake for 10 minutes on a reciprocal shaker . Make serial dilutions up to 10 dilution. Pipette out 1 ml aliquots of 10 to 10 dilution and deliver it to screw cap tubes or test tubes containing N-free semi solid Nfb media.
4. Incubation of tubes
Label the tubes and incubate at 36 ± 1 ° C for 3-4 days in vertical position in a test tubes stand. Do not disturb the medium during the entire period of incubation.
5. Counting
5.1 Count the tubes which have turned blue and have developed typical white sub -surface pellicle.
5.2 Count the tubes as + ve or -ve for the presence of sub - surface pellicle and consider for the purpose of calculation.
5.3 Methodfor Estimating MPN Count
5.3.1 To calculate the most probable number of organisms in the original sample , select as P₁ the number of positive tubes in the least concentrated dilution in which all tubes are positive or in which the greatest number of tubes is +ve , and let P2 and P3 represent the numbers of positive tubes in the next two higher dilutions .
5.3.2 Then find the row of numbers in Table 1 in which P₁ and P2 correspond to the values observed experimentally. Follow that row of numbers across the table to the column headed by the observed value of P.
5.3.3 The figure at the point of intersection is the most probable number of organisms in the quantity of original sample represented in the inoculum added in the second dilution . Multiply this figure by the appropriate dilution factor to obtain the MPN value .
5.3.4 Azospirillum count/g of carrier = Value from MPN table * x Dilution level Dry mass of product 33
भारत का राजपत्र असाधारण
[ भाग II खण्ड 3 ( ii) ]
Table 1
*Most Probable Numbers for use with 10 fold dilution and 5 tubes per dilution (Cochran, 1950)
Most probable number for indicated values ofP3
P2 0 1 2 3 4 5
PL
0 0 0.018 0.036 0.054 0.072 0.090
0 1 0.018 0.036 0.055 0.073 0.091 0.11
0 2 0.037 0.055 0.074 0.092 0.11 0.13
0 3 0.056 0.074 0.093 0.11 0.13 0.15
0 4 0.075 0.094 0.11 0.13 0.15 0.17
0 5 0.094 0.11 0.13 0.15 0.17 0.19
1 0 0.020 0.040 0.060 0.080 0.10 0.12
1 1 0.040 0.061 0.081 0.10 0.12 0.14
1 2 0.061 0.082 0.10 0.12 0.16 0.17
1 3 0.089 0.10 0.13 0.16 0.17 0.19
1 4 0.11 0.13 0.15 0.17 0.19 0.22
1 5 0.13 0.15 0.17 0.19 0.22 0.24
2 0 0.046 0.068 0.091 0.12 0.14 0.16
2 1 0.068 0.092 0.12 0.14 0.17 0.19
2 0.093 0.12 0.14 0.17 0.19 0.22
2
2 3 0.12 0.14 0.17 0.20 0.22 0.25
0.15 0.17 0.20 0.23 0.25 0.28
2 4
2 5 0.17 0.20 0.23 0.26 0.29 0.32
3 0 0.078 0.11 0.13 0.16 0.20 0.23
3 0.11 0.14 0.17 0.20 0.23 0.27
1
3 2 0.14 0.17 0.20 0.24 0.27 0.31
3 3 0.17 0.21 0.24 0.28 0.31 0.35
4 0.21 0.24 0.28 0.32 0.36 0.40
3
33 5 0.25 0.29 0.32 0.37. 0.41 0.45
3
4 0 0.13 0.17 0.21 0.25 0.30 0.36
44 0.17 0.21 0.26 0.31 0.36 0.42
4 1
4 2 0.22 0.26 0.32 0.38 0.44 0.50
0.27 0.33 0.39 0.45 0.52 0.59
4 3
0.34 0.40 0.47 0.54 0.62 0.69
4 4
0.41 0.48 0.56 0.64 0.72 0.81
4 5
0.23 0.31 .0.43 0.58 0.76 0.95
5 0
0.33 0.46 0.64 0.64 1.1 1.3
5 1
0.49 0.70 0.95 1.2 1.5 1.8
5 2
1.1 1.4 1.8 2.1 2.5
5 3 0.79
1.7 2.2 2.8 3.5 4.3
5 4 1.3
5 5 2.4 3.5 5.4 9.2 16.0
397490705-6 34
THE GAZETTE OF INDIA EXTRAORDINARY
[PART II-SEC. 3 (ii ) ]
(ii) in sub -heading ' 1.D relating to Method of Analysis of Phosphate Solubilising . Bacterial Biofertiliser ' , in serial number 5 relating to ' Determination of Soluble Phosphorus Using Ascorbic Acid' , under serial number 5.3.3 relating to ' Procedure ' , for items ( i) and ( ii ) , the following shall be substituted , namely: -
" (i) Preparation of Sample
:
Pure culture medium same as at 2.1 above excluding agar. Prepare broth medium in 100 ml aliquots in 6 no . , 250 ml conical flasks and sterilize in autoclave at 121 ° C for 20 min .
(ii) Inoculation of Medium
Select one PSB colony of the type that has been counted as PSB (showing sufficient zone of solubilization ) and streak on set medium as described at 2.1 in a Petri dish . Use this pure culture for inoculating the broth . Inoculate 3 flasks and keep 3 flasks as uninoculated control . Incubate the flasks over rotary shaker for 12 days at 28 + .1 ° C . After 12 days , filter the contents of each flask separately through Whatman No. 42 filter paper or centrifuge at 10,000 rpm for 15 min.
(iii) Add 10 ml of filtrate/ centrifugate to 50 ml of olsen extractant and shake for 30 min over rotary shaker .
(iv) Filter the suspension through Whatman filter paper No. 40. If the filtrate is coloured then add a tea spoon of Dacro - 60 (activated phosphorous free carbon) , reshake and filter.
(v) Take a known aliquot (5 to 25 ml) of the extract in a 50 ml volumetric flask.
(vi) Add 5 drops of p - nitrophenol indicator ( 1.5 per cent solution in water) and adjust the pH of the extract between 2 and 3 with the help of 4NH2SO4 . The yellow colour will disappear when the pH of the solution becomes 3. Swirl gently to avoid loss of the solution along with the evolution of CO2 .
(vii) When the CO2 evolution has subsided , wash down the neck of the flask and dilute the solution to about 40 ml .
(viii) Add 5 ml of the sulphomolybdic acid mixed reagent containing ascorbic acid , swirl the content and make up the volume .
(ix) Measure the transmission after 30 min at 880 nm using red filter . The blue colour developed remains stable upto 60 minutes .
(x) Record the concentration of phosphorous (P) in the extract form from the standard curve and calculate the concentration of soluble phosphorous as follows: " 35
भारत का राजपत्र असाधारण
[ भाग II-खण्ड 3 ( ii) ]
iii) in sub -heading 4 relatingto Packing, marking , storage and use, -
(
(ia) in serial number 4.1 relating to ' Packing ' , for the words "Bio - fertiliser shall be packed in polyethylene packs , thickness which, shall not be less than 75-100 micron" shall be substituted by the following words and figures , namely: -
"Biofertilizers shall be packed in suitable plastic bags/packets , thickness of which shall not be less than 75-100 micron or in suitable plastic bottles." ;
(ib) in serial number 4.2 relating to ' Marking' , in entry (g) , for the words and number "Expiry date which shall not be more than 6 months from the date of manufacture", the words and letters "Expiry date which shall not be less than 6 months from the date of manufacture in case of carrier based powdered/granulated formulation of Rhizobium, Azotobacter, Azospirillum and PSB biofertilisers and liquid based Rhizobium biofertiliser, while it shall not be less than twelve months from the date of manufacture in case of liquid based Azotobacter, Azospirillum and PSB biofertilisers " shall be substituted.
6. In Schedule IV , -
(a) for Part A, and entries relating thereto , the following shall be substituted , namely: -
"PART A
1. City compost:
Moisture, per cent by weight (i)
Colour
(ii)
Odour
(iii)
Particle size (iv)
(v) Bulk density (g/cm³)
(vi)
15.0-25.0
Dark brown to black
Absence of foul odour
Minimum 90% material should pass through 4.0 mm IS sieve
<1.0
12.0
Total organic carbon, per cent by
weight, minimum
(vii)
0.8
Total Nitrogen (as N) , per cent by
weight, minimum
(viii)
0.4
Total Phosphates (as P2O5) , per cent
by weight, minimum
(ix)
0.4
Total Potash (as K2O) , per cent by
weight, minimum
C:N ratio
(x)
pH
(xi)
3974Gl /2009-6
<20
6.5-7.5 36
THE GAZETTE OF INDIA : EXTRAORDINARY
(xii)
dsm¯¹ ) ,
Conductivity(as more than
(xiii) Pathogens
(xiv)
[PART 11 SEC. 3 (ii ) ]
not
4.0
Nil
Heavy metal content, (as mg/Kg ) ,
maximum
Arsenic as (As2O3 )
Cadmium (as Cd)
Chromium (as Cr)
Copper (as Cu)
Mercury (as Hg)
Nickel (as Ni)
Lead ( as Pb)
Zinc (as Zn)
2. Vermicompost :
( i) Moisture, per cent by weight
Colour
(ii)
(iii) Odour
(iv) Partiole size
(v) Bulk density (g/cm³ ) 10.00
5.00
50.00
:
300.00
0.15
50.00
100.00
1000.00
15.0-25.0
Dark brown to black
Absence of foul odour
mm IS sieve Minimum 90% material should pass through 4.0
0.7-0.9
18.0
(vi) Total organic carbon, per cent by weight, minimum
1.0
(vii ) Total Nitrogen (as N) , per cent by weight, minimum
0.8
(viii ) Total Phosphate ( as P2O5 ) , per cent by weight , minimum
(
0.8
ix) Total Potassium ( as K2O) , per cent by weight, minimum
(
x) Heavy metal content, (as mg/Kg) , maximum
Cadmium ( as Cd)
Chromium ( as Cr)
Nickel (as Ni)
Lead (as Pb)
5.0
50.00
50.00
100.00"
(b). in Part B, under the heading ' Tolerance Limit of Organic Fertilisers ' , for the figures and words " 0.1 unit for combined nitrogen , phosphorus and potassium nutrients" , the figures and words " A sum total of nitrogen, phosphorus and potassium nutrients shall 37
भारत का राजपत्र असाधारण
[भाग II-खण्ड 3 (ii) ]
not be less than 1.5% in City Compost and shall be not less than 2.5% in case of vermicompost " , shall be substituted.
(c) for Part D, and entries relating thereto , the following shall be substituted namely;
PART D
METHODS OF ANALYSIS OF ORGANIC FERTILISERS
1. Estimation of pH
Make 25 g of compost into a suspension in 50ml of distitled water and shake on a rotary shaker for 2 hours .
Filter through Whatman No. 1 or equivalent filter paper under vacuum using a Buchner funnel .
Determine pH of the filtrate by pH meter .
2. Estimation of Moisture
Method:
Weigh to the nearest mg about 5 gm of the prepared sample in a weighed clean, dry Petri dish. Heat in an oven for about 5 hours at 65° + 1 ° c to constant weigh, Cool in a desicator and weigh . Report percentage loss in weight as moisture content .
Calculation
Moisture percent by weight 100 (B -C ) B-A
A= Weight of the Petri dish
B= Weight of the Petri dish plus materiał before drying
C= Weight of the Petri dish plus material after drying
3. Estimation of Bulk density
Requirement
100 ml measuring cylinder
Weighing balance Hot air oven
Rubber pad [ 1 sq foot ; 1 inch thickness ] 38
THE GAZETTE OF INDIA : EXTRAORDINARY
[PART II-SEC. 3( ii) ] Method
Weigh a dry 100ml cylinder (W 1 gill)
Cylinder is filled with the sample upto the 100 ml mark . Note the volume (Vl ml)
Weigh the cylinder along with the sample (W2gm)
Tap the cylinder for two minutes .
Measure the compact volume (V2 ml) .
Calculation
Bulk density
Weight of the sample taken ( W2 - W1 )
Volume (V1 - V2)
:
4. Estimation of Electrical Conductivity
Requirements:
- 250 ml flask
- Funnel [ OD - 75 mm)
100 ml beaker
Analytical balance
- Potassium chloride [ AR grade]
Filterpaper
-Conductivity meter [ With temperature compensation system]
Method
Pass fresh sample of organic fertilizer through a 2-4 mm sieve .
Take 20gm of the sample and add 100ml of distitled water to it to give a ratio of 1:5.
Stir for about an hour at regular intervals .
Calibrate the conductivity meter by using 0.01M potassium chloride solution .
Measure the conductivity of the unfiltered organic fertilizer suspension.
Calculation
Express the results as millimho's or ds/ cm at 25 ° C specifying the dilution of the organic fertilizer suspension viz . , 1 : 5 organic fertilizer suspension .
5. Estimation of Organic Carbon
Apparatus
(i) Silica/Platinum crucible 25 g cap.
(ii) Muffle Furnace
Procedure
Accurately weigh 10 gm of sample dried in oven at 105 ° C for 6 hrs , in a pre weighed crucible and ignite the material in a Muffle furnace at 650-700 °C for 6-8 hrs . Cool to room temperature and keep in Desiccator for 12 hrs .
Weigh the contents with crucible 39
भारत का राजपत्र असाधारण
[भाग II-खण्ड 3 ( ii ) ]
Calculation
Calculate the total organic carbon by the following formulae: -
Total Organic matter %
= Initial wt- final wt. X 100 wt. of sample taken
=
Total C%
total organic matter" 1.724
6. Estimation of total Nitrogen
Asmentioned under Schedule - II, Part -B , 3 (v) of FCO, 1985 .
7. Estimation of C : N Ratio
Method
Calculate the C :N ratio by dividing the organic carbon value with the total nitrogen value.
8. Estimation of phosphate
Preparation of sample - Accurately weigh 10 gm oven dried sample in 50 g cap . silica crucible and ignite it to 650° -700 °C for 6-8 hrs to obtain ash. Cool and keep in a Dessicator.
Transfer the contents to a 100 ml beaker . Add 30 ml 25% HCl . Wash the crucible with 10 ml 25% HCl twice and transfer the contents to Beaker. Heat over hot plate for 10-15 min. Keep for 4 hrs . Filter through Whatman No.1 filter paper . Wash with distilled water 4-5 times (till acid free) .
Make up the volume of filtrate to 250 ml in a volumetric flask.
Estimate total P by gravimetric quinoline molybdate method as described under Schedule - II , Part B, 4( ii) of FCO 1985 .
9. Estimation of Potassium
Flame photometry method: - Total Potassium are usually determined by dry ashing at 650-700 Degree Centigrade and dissolving in concentrated hydrochloric acid.
Reagent and Standard curve
(1) Potassium chloride standard solution: Make a stock solution of 1000 ppm K by dissolving 1.909 g . of AR grade potassium chloride (dried at 60 Degree C. for 1 h) in distilled water 1 ; and diluting up to 1 litre . Prepare 100 ppm standard by diluting 100 ml of 1000 ppm stock solution to 1 litre with extracting solution.
(2) Standard curve : Pipette 0,5 , 10,15 and 20 ml of 100 ppm solution into 100 ml volumetric flasks and make up the volume upto the mark. The solution contain 0,5 , 15 & 20 ppm K respectively.
Procedure:
3974GI/2009-7 40
THE GAZETTE OF INDIA : EXTRAORDINARY
[PART II-SEC. 3( ii ) ]
*Take 5g sample in a porceline crucible and ignite the material to ash at 650-700 C in a muffle furnace.
* Cool it and dissolve in 5 ml concentrated hydrochloric acid , transfer in a 250 ml beaker with several washing of distilled water and heat it . Again transfer it to a 100 ml volumetric flask and make up the volume.
*Filter the solution and dilute the filtrate with distilled water so that the concentration of K in the working solution remains in the range of 0 to20 ppm , if required.
*Determine K by flame photometer using the K- filter after necessary setting and calibration of the instrument .
*Read similarly the different concentration of K of the standard solution in flame photometer and prepare the standard curve by plotting the reading against the different concentration of the K.
Calculation: Potash (K) %by weight = R X 20 X diluting factor, where R= ppm of K in the sample solution (obtained by extra plotting from stand curve) .
"10. Estimation of Cadmium , Copper, Chromium , Lead , Nickel and Zinc
Material Required
1. Triacid mixture: Mix 10 parts of HNO3 (Nitric acid) , 1 part ofH2SO4 (Sulphuric Acid) and 4 parts of HCIO3 ( Perchloric Acid)
2. Conical flask , 250ml
3.Hot plate
4. Whatman filter paper No.42
5. Atomic Absorption Spectrophotometer
Processing of sample
Take 5.0 g or suitable quantity of oven dried ( 105 ° C ) sample thoroughly ground and sieved through 0.2 mm sieve in a conical flask.
Add30 ml triacid mixture , cover it with a small glass funnel for refluxing. Digest the sample at 200° C on a hot plate till the volume is significantly reduced with a whitish residue.
After cooling, filter the sample with Whatman No. 42 filter paper, make up to 100 ml ina volumetric flask .
Preparation of working standards
:
Cadmium - As mentioned under Schedule - II , Part B, 8 (x ) of FCO ( 1985) Copper - As mentioned under Schedule - II , Part B , 8 ( iv) of FCO ( 1985 ) 41
भारत का राजपत्र असाधारण
[भाग II-खण्ड 3 (ii ) ]
Chromium - Dilute 1 , 2, 3 and 4 ml of standard 199 ppm Chromium standard solution with doubled distilled water in volumetric flasks and make up the volume to 100 ml to obtain standards having concentrations of 1 , 2, 3 , 4 ppm
Lead- As mentioned under Schedule - II , Part B, 8 (v) of FCO (1985 ) Nickel Dilute 1,2,3 and 4 ml of standard 100 ppm Nickel standard solution with doubled distilled water in volumetric flasks and make up the volume to 100ml to obtain standards having concentrations of 1 , 2, 3, 4 ppm
Zinc - As mentioned under Schedule - II , Part B, 8 ( ii) of FCO ( 1985)
Measurement of Result
Estimate the metal concentrations of Cd, Cu, Cr, Fe , Pb, Ni, Zn by flaming the standard solution and samples using atomic absorption spectrophotometer (AAS) as per the method given for instrument at recommended wavelength for each element. Run a blank following the same procedure.
Expression of Result
Express the metal concentration as mg/g on oven dry weight basis in 3 decimal units.
(Reference: Manual for Analysis of Municipal Solid Waste (compost) : Central Pollution Control Board) ."
11. 'Estimation of Mercury
Reagents:
(a) Concentrated Nitric acid (HNO3 )
(b) Concentrated Sulphuric acid (H2SO4)
(c) Potassium persulphate (5% solution) : Dissolve 50g of K2S2O3 in 1 litre ofdistilled water.
(d) Potassium permagnate (5 % solution): Dissolve 50g of KMnO4 in 1 litre of distilled water .
(e) Hydroxylamine sodium chloride solution: Dissolve 120 g of Hydroxyl amine salt and 120 g of sodium chloride (NaCI) in 1 litre distilled water.
(f) Stannous chloride (20% ) : Dissolve 20 g of SnCl2 in 100 ml distilled water.
Materials required
(a) Water bath
(b) Flameless atomic absorption spectrophotometer or cold vapour mercury analyzer .
(c) BOD bottle , 300 ml
Processing of sample:
42
THE GAZETTE OF INDIA : EXTRAORDINARY
[PART II-SEC . 3( ii ) ]
(a) Take 5 g ( finely ground but not dried) sample in an oven at a temperature of 105°C for 8 hours for moisture estimation.
(b) Take another 5 g sample ( finaly ground but not dried) in a BOD bottle , add to it 2.5 ml of conc. HNO3, 5ml of cone. H2SO4 and 15 ml of 5% KMnO4.
(c) After 15 minutes add 8 ml of 5 % K2S2O8 .
(d) Close the bottle with the lid and digest it on a water bath at 95 °C for 2 hours .
(e) After cooling to room temperature add 5 ml hydroxylamine sodium chloride soln.
Measurement :
Reduction of the digested sample is brought out with 5 ml of 20% SnC12 immediately before taking the reading, using a cold vapour mercury analyzer .
Expression of results:
units. Express the mercury concentration as mg/ g on oven dry weight basis in 3 decimal
(Reference : Manual for Analysis of Municipal Solid Waste (compost) . Central Pollution Control Board).
" 12. Estimation of Arsenic
Processing of sample - Suspend 10 gm finely ground sample in 30 ml aquaregia (ΗΝΟ3 + HCl in a ratio of 1 : 3 ) in a beaker . Keep on hot plate till moist black residue is obtained (do not dry) . Add 5 ml aquaregia and allow to dry on hot plate till residue is moist. Dissolve the residue in 30 ml conc . HCl and filter through Whatman No.1 filter paper in 100 ml volumetric flask . Wash filter paper 3-4 times with double distilled water . Make up the volume to 100 ml. Take 1 ml of this solution in 100 ml volumetric flask , add 5ml conc. HCl and 2 gm KI and make up the volume to 100 ml .
Prepare standards having concentration of 0.05 , 0.1 and 0.2 ppm by diluting 0.05, 0.1 and 0.2 ml , respectively of standard Arsenic solution with double distilled water in volumetric flask and make up the volume to 100 ml
Measurement - Estimate Arsenic using vapour generation assembly attached to Atomic Absorption Spectrophotometer as per the procedure given for the instrument.
13. Pathogenicity Test
Apparatus
1. Samples of Compost
2. Lactose Broth of Single and Double Strength
3. Culture Tubes
4. Durham Tubes
5. Bunsen Burner
6. Sterile Pipettes
7. Incubator , Autoclaves , 43 भारत का राजपत्र असाधारण
[ भाग II-खण्ड 3 (ii) ]
8. Petri -Plates
9. Inoculation Loops
Preparation of Culture Media
A. For Presumptive Test
1. LactoseBroth
BeefExtract
Peptone
Lactose
D.W.
: 6.0 g
:10.0 g
:10.0 g
:1000 ml
B. For Confirmative Test
1. Eosine Methylene Blue Agar Media (EMB Media)
Peptone
Lactose
Sucrose
K2HPO4
Eosine Y
Methylene Blue
Agar
D.W.
C. For Completed Test
1.NutrientAgar
BeefExtract
Peptone
Procedures
A. Presumptive Test :10.0 g
: 5.0 g
:5.0 g
: 2.0 g
:0.4g
: 0.06 g
15.0 g
: 1000 ml
:3.0 g
: : 5.0 g
1. Prepare 12 tubes of lactose broth for each sample and close the tube with cotton plugs/caps and autoclave at 121 ° C for 20 min.
2. Fill Durham tubes with sterilized distilled water and keep in beaker and autoclave at 121°C for 20 min.
3. Suspend 30 g of compost sample in 270 ml of sterile distilled water and serially dilute upto 10 dilution as per Schedule III , Part D, serial number 3 of FCO ( 1985 )
4. Suspend 1 ml suspension from 10 to 10 in 3 tubes for each dilution
5. Insert distilled water filled Durham tube in inverted position in each tube and close the tube again
6. Inoculate tubes at 36° C for 24h in incubator
Result
Confirms the presence of coliforms in the sample Production of gas within 24h
Doubtful Test
Production of gas within 48h
Negative Test
No Gas Production 44
THE GAZETTE OF INDIA : EXTRAORDINARY
[PART II -SEC . 3( ii ) ]
B. Confirmative Test
Confirmative test is for differentiating the coliforms from non - coliforms as well as Gram negative and Gram positive bacteria. In this test , the EMB agar plates are inoculated with sample from positive tubes producing gas . Emergence of small colonies with dark centres confirms the presence of Gram negative , lactose fermenting coliform bacteria. Sometimes some of the non - coliforms also produce gas , therefore, this test is necessary .
1. Prepare EMB agar plates with the composition as per the method at Schedule III , Part D, paragraphs 2.3.3 to 2.3.6
:
2. Inoculate plates with the help of inoculation loop with streaking of samples showing positive/doubtful tests in the presumptive test
3. Incubate plates at 30± 1 ° C for 12 h in incubator
4. Dark centred or nucleated colonies appear which may differentiate between E. coli and E. aerogenes based on size of colonies and metallic sheen
Result
E. coli colonies on this medium are small with metallic sheen , where as E. aerogenes colonies are usually large and lack the sheen.
C. Completed Test
Thistest is required for further confirmation .
Procedure
1. Pick up a single colony from EMB agar plate
2. Inoculate it into lactose broth and streak on a nutrient agar slant
3. Incubate the slants
4. Perform Gram reaction after attaining the growth
Result
Gram -negative nature of bacteria is indicative of a positive completed test ."
[F. No. 2-2/2009 Fert . Law]
PANKAJ KUMAR , Jt . Secy .
Note : The Principal Order was published in the Gazette of India, Extra Ordinary, Part II , Section (3 ) , Sub section (i ) vide number G.S.R. 758 (E) dated the 25th September , 1985 and subsequently amended by -
1. G.S.R.201 (E ) dated 14th February , 1986
2. G.S.R. 508 (E) dated 19th March , 1986
3. G.S.R. 1160 (E ) dated 21st October , 1986
4. S.O. 822(E) dated 14th September , 1987
5. S.O. 1079 (E) dated 11th December , 1987 45
भारत का राजपत्र असाधारण
[ भाग II-खण्ड 3 (ii ) ]
6. S.O.252(E) dated 11th March, 1988
7. S.O. 724(E) dated 28th July , 1988
8. S.O. 725 (E) dated 28th July, 1988
9. S.O. 940 (E) dated 11th October, 1988
10. S.O. 498 (E) dated 29th June, 1989
11. S.O. 581 (E) dated 27th July, 1989
12. S.O. 673 (E) dated 25th August, 1989
13. S.O. 738 (E) dated 15th September , 1989
14. S.O. 140(E) dated 12th February, 1990
15. S.O. 271 (E) dated 29th March, 1990
16. S.O. 403 (E) dated 23rd May , 1990
17. S.O. 675 (E ) dated 31st August, 1990
18. S.O. 261 (E) dated 16th April , 1991
19. S.O. 444(E) dated 2nd July, 1991 20. S.O. 530(E) dated 16th August , 1991
21. S.O. 795 (E) dated 22nd November, 1991
22. S.O. 377 (E) dated 29th May, 1992
23. S.O. 534(E) dated 20th July, 1992
24. S.O. 826(E) dated 9th November, 1992
25. S.O. 254(E) dated 3rd June, 1993
26. S.O. 397 (E) dated 18th June, 1993
27. S.O. 942 (E) dated 10th December , 1993
28. S.O. 163 (E) dated 14th February , 1994
29. S.O. 340(E) dated 17th April, 1995
30. S.O. 459(E) dated 22nd May, 1995
31. S.O. 835 (E) dated 12th October, 1995
32. S.O. 575 (E) dated 20th August , 1996
33. S.O. 57(E) dated 22nd January, 1997
34. S.O. 329(E) dated 12th May, 1999
35.-S.O. 1068(E) dated 4th November , 1999
36. S.O. 49 (E) dated 16th January, 2003
37. S.O. 373 (E) dated 1st April , 2003
38. S.O. 413 (E) dated 7th April , 2003
39. S.O. 540(E) dated 4th May, 2003
40. S.O. 342(E) dated 18th March, 2005
41. S.O. 1772 (E) dated 17th October , 2006
42. S.O. 2164 (E) dated 28th December, 2007
43. S.O. 837 (E) dated 10th April , 2008
44. S.O. 1741 (E) dated 22nd July, 2008
45. S.O. 401 (E) dated 5th February, 2009.
46. S.O. 1214 (E) dated 14th May, 2009
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and Published by the Controller of Publications . Delhi - 110054.